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文檔簡介
1、目的: 建立穩(wěn)定的D-gal氧化應(yīng)激模型,觀察白花丹參水提物對該模型小鼠主要器官心、腦、腎以及血清中氧自由基域相關(guān)指標(biāo)的影響并結(jié)合病理結(jié)構(gòu)及其超微結(jié)構(gòu)的改變,探討應(yīng)用白花丹參水提物是否具有抗氧化應(yīng)激作用,并初步分析其作用機制,進而推廣白花丹參這一珍稀物種的應(yīng)用。 方法: 實驗采用D-半乳糖頸背部皮下注射方式制備氧化應(yīng)激小鼠模型。實驗小鼠隨機分為空白對照組(control group,CG)、模型組(model g
2、roup,MG)、丹酚酸B對照組(salvianolic acid B,SB)、白花丹參高劑量組 (high-dose Salvia miltiorrhizaBge.f.alba.C.Y. Wu.et H·W·Li,HS)、白花丹參中劑量組 (middle-dose Salvia miltiorrhizaBge.f.alba.C.Y.Wu.et H·W·Li,MS)、白花丹參低劑量組 (low-dose Salvia miltiorrh
3、izaBge.f.alba.C.Y.Wu.et H·W·Li,LS) 6組,每組 18 只。MG、SB、HS、MS、LS 各組均予以頸背部皮下注射5%D-半乳糖0.1ml/10g/d 進行氧化損傷。同時,SB組灌服丹酚酸B溶液(0.002g/kg);HS、MS、LS組分別按40g/kg、20g/kg、10g/kg的劑量灌服白花丹參根生藥水提物,CG、MG 兩組均灌服相當(dāng)量的生理鹽水。30天后,每組取10只小鼠,眼球取血,分離血清;然后將
4、這10只斷頭處死,分別取心、腦、腎三種組織,做成組織勻漿與血清一同進行MDA、SOD、T-AOC、ROS的測定:每組分別取5只、3只小鼠,經(jīng)心灌注固定后,分別取心、腦、腎制做石蠟切片和電鏡樣本,觀察其光鏡下以及電鏡下結(jié)構(gòu)的改變。通過與陽性對照組比較,觀察三個劑量的白花丹參水提物對氧化應(yīng)激小鼠氧自由基域相關(guān)指標(biāo)及組織形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響。 結(jié)果: 1、白花丹參制劑對OS小鼠病理形態(tài)學(xué)的影響 光鏡下病理形態(tài)學(xué)顯示,CG組小
5、鼠腦皮層神經(jīng)元形態(tài)規(guī)則、邊界清晰,而MG組小鼠腦組織皮層區(qū)神經(jīng)元固縮、胞漿深染,軟腦膜輕微水腫。CG 組小鼠心肌纖維細(xì)短,有分支連接成網(wǎng),核卵圓形;MG 組心肌纖維走向紊亂,,間質(zhì)水腫;各用藥組均使纖維走向趨于整齊;而在腎臟,各組光鏡下結(jié)構(gòu)改變不是很明顯。 電鏡下觀察超微結(jié)構(gòu)顯示,CG組三種組織細(xì)胞的胞膜是光滑完整的,細(xì)胞器豐富;MG組神經(jīng)元細(xì)胞膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、線粒體膜、核膜不同程度的受損、水腫;心肌纖維膜同時受損,甚至溶解斷裂;腎
6、小球基底膜稍增厚。上述MG組的表現(xiàn),在用藥后都不同程度地得以改善。 2、白花丹參制劑對OS小鼠心、腦、腎組織MDA、ROS含量及 SOD、T-AOC 活性的影響 MG 組血清、腦組織中MDA、ROS含量和SOD、T-AOC活性均較CG組有明顯不同(P<0.01),各用藥組均能減輕D-gal造成的損傷,MS組作用最強(P<0.01);MG組心臟、腎臟中SOD、ROS、MDA(P<0.01)與T-AOC(P<0.05)分別和
7、CG組有差異,各用藥組能不同程度的減輕損傷,LS的作用相對較輕(P<0.05)。 結(jié)論: 5%D-半乳糖0.1ml/10g/d 頸背部連續(xù)皮下注射30天后,小鼠血清和心腦腎組織內(nèi) MDA、ROS含量明顯增多,SOD、T-AOC活性顯著降低,加劇了組織的氧化損傷。白花丹參制劑和Sal B一樣,能顯著降低MDA、ROS的含量,提高SOD、T-AOC的活性與能力,說明該藥物可清除自由基,增強體內(nèi)抗氧化酶的活力,具有抗氧化應(yīng)激的
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