七氟醚對(duì)缺血再灌注損傷所致內(nèi)皮細(xì)胞糖蛋白被膜脫落的保護(hù)作用.pdf

1、目的：
　　 討論缺血再灌注損傷導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞糖蛋白被膜脫落的程度及機(jī)理，七氟醚對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞糖蛋白被膜的保護(hù)作用及機(jī)理，以及不同處理模式對(duì)保護(hù)作用的影響。
　　 材料與方法：
　　 本研究采用豚鼠Langendorff離體心臟灌注模型，灌注壓固定在70cmH2O，灌注液選用改良Krebs-Henseleit液。分兩部分進(jìn)行。第一部分，健康雄性豚鼠42只，隨機(jī)分為6組，A組為時(shí)間對(duì)照組，B組為七氟醚處理的時(shí)間對(duì)照組，C

2、組為缺血再灌注損傷組，D組為用七氟醚預(yù)處理的缺血再灌注損傷組，E組為用七氟醚后處理的缺血再灌注損傷組，F(xiàn)組為用七氟醚預(yù)處理合并后處理的缺血再灌注損傷組。制備Langendorff離體心臟灌注模型。缺血再灌注損傷組接受20分鐘全心停灌暖缺血(37℃)，再灌注40分鐘。七氟醚預(yù)處理組在20分鐘暖缺血前接受15分鐘2％七氟醚處理，七氟醚后處理組在20分鐘暖缺血后在整個(gè)再灌注期間接受2％七氟醚處理。再灌注的后20分鐘在K-H液中加入1％賀斯。觀

3、測(cè)指標(biāo)包括滲出液，流出液的量，滲出液中組胺，肌酸激酶濃度，賀斯?jié)舛龋鞒鲆褐袃?nèi)皮細(xì)胞糖蛋白被膜主要成分-蛋白聚糖-1，硫酸化肝素，透明質(zhì)酸濃度，乳酸，嘌呤，尿酸濃度。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，一些心臟被用于蛋白聚糖-1和硫酸化肝素的免疫組化染色，另一些心臟被用于電鏡觀察糖蛋白被膜的形態(tài)。第二部分，健康雄性豚鼠12只，隨機(jī)分為2組，C組為缺血再灌注損傷組，F(xiàn)組為缺血預(yù)處理合并后處理的缺血再灌注損傷組。實(shí)驗(yàn)其他條件同前。觀測(cè)指標(biāo)為滲出液及流出液中組織蛋白

4、酶B，類胰蛋白酶，不合凝血素的類胰蛋白酶濃度。
　　 結(jié)果：
　　 1、缺血再灌注處理能引起滲出液增加，流出液減少，顯著增加流出液中乳酸，嘌呤，尿酸濃度以及蛋白聚糖-1，硫酸化肝素，透明質(zhì)酸濃度和滲出液中肌酸激酶，組胺及賀斯?jié)舛取?br>　　 2、免疫組化染色顯示缺血再灌注處理使血管腔內(nèi)的蛋白聚糖-1和硫酸化肝素染色呈陰性，鑭染色電鏡觀察顯示缺血再灌注處理使血管腔內(nèi)的糖蛋白被膜幾乎全部脫落。
　　 3、應(yīng)用七氟

5、醚處理能減少滲出液以及滲出液中賀斯和肌酸激酶含量，但對(duì)滲出液中組胺含量沒有明顯影響。七氟醚處理能增加流出液的量，但對(duì)流出液中乳酸，嘌呤，尿酸濃度沒有顯著影響。七氟醚處理能降低流出液中糖蛋白被膜主要成分的濃度，使免疫組化染色蛋白聚糖-1和硫酸化肝素的染色增強(qiáng)，使電鏡觀察到的糖蛋白被膜脫落減少。
　　 4、七氟醚還能使流出液中組織蛋白酶B濃度降低，對(duì)類胰蛋白酶和不含凝血素的類胰蛋白酶濃度無顯著影響。
　　 5、七氟醚處理的各

6、組之間作用無顯著差異。
　　 結(jié)論：
　　 1、缺血再灌注處理能使內(nèi)皮細(xì)胞糖蛋白被膜脫落，增加內(nèi)皮細(xì)胞通透性，并能顯著增加心肌的氧化應(yīng)激和無氧代謝，增加心肌細(xì)胞肌酸激酶和主細(xì)胞組胺的釋放，降低心功能。
　　 2、七氟醚預(yù)處理或后處理能夠顯著減少內(nèi)皮細(xì)胞糖蛋白被膜的脫落，減少內(nèi)皮細(xì)胞通透性從而降低滲出液中賀斯?jié)舛?，降低心肌?xì)胞肌酸激酶的釋放，改善再灌注后的心功能。但是對(duì)心肌的氧化應(yīng)激和代謝無顯著影響，也不能阻止主細(xì)