牙胚的體外重建模式及相關免疫調控研究.pdf

1、組織器官的上皮-間充質相互作用是細胞增殖、組織再生和形態(tài)形成所必需的。同樣，上皮-間充質相互作用的時空表達調控決定了牙齒的發(fā)生、形態(tài)的形成和牙本質的成熟和牙源性細胞的分化，在牙齒發(fā)生的初期，上皮-間充質相互作用并分泌誘導因子，這些因子促進彼此細胞增殖、遷移、極化和分化，最終調控牙胚的形成。牙齒的發(fā)育研究證實牙胚細胞上皮-間充質在發(fā)育的不同時期保留了發(fā)育的遺傳信息，能重組并形成牙齒樣組織。然而，這些研究僅限于對牙齒相關組織的形成觀察，而缺

2、乏對體外牙齒重建本身的生物學特性進行深入的研究。此外，牙齒在發(fā)育時期的分子及細胞調控采用常規(guī)方法難以進行相關研究，因此在體外實現(xiàn)牙胚的重建對于我們了解牙齒發(fā)育與再生模式也具有重要的意義，但相關免疫調控機理研究并未闡明。因此，本試驗我們提供了不同的方式進行組織工程牙胚的構建及相關免疫調控機制研究，為下一步實現(xiàn)真正意義上的牙齒再生修復提供理論依據(jù)。
　　我們比較了牙胚細胞在體內腎被膜下、腸系膜內和皮下移植的生長與發(fā)育情況，為進一步明確

3、牙齒的體外重建探尋合適的生長環(huán)境。結果表明移植于腎被膜下的牙胚生長良好，可見釉質和牙髓牙本質復合體，其余移植模式未見進一步發(fā)育趨勢，皮下構建的牙胚部分從皮膚脫落而喪失，而在腸系膜內可見大量浸潤的淋巴細胞。在此基礎上，我們采用大鼠牙胚間充質細胞和牛真皮基質蛋白構建了可注射組織工程牙齒并探討了在體內腎被膜移植的成牙能力研究的可行性。組織工程牙胚移植后2周可在腎被膜下形成典型的牙髓牙本質復合體樣組織和釉質樣結構,為進一步探討臨床應用及相關免疫

4、調控，我們觀察了異體牙胚細胞重建后的免疫反應，明確誘導免疫抑制藥物他克莫司對免疫相關因子的影響。腸系膜移植后移植物內可見大量浸潤的淋巴細胞，應用他克莫司后，CD4+T細胞和IL-2的分泌明顯下降，牙胚細胞可在大網(wǎng)膜內進一步發(fā)育形成牙髓-牙本質復合體。本試驗探索了牙齒體外重建方式及進一步發(fā)育的良好微環(huán)境。同時為以后牙胚細胞用于牙齒重建的臨床應用提供了實驗基礎。
　　綜上所述，本研究首次對牙胚不同發(fā)育時期牙胚細胞的體外重建能力及移植模