雞ESRα基因SNPs分析及其與早期產(chǎn)蛋性能關(guān)系的研究.pdf

1、雌激素受體(ESR)是一種與特異激素應(yīng)答DNA元件相結(jié)合的激活轉(zhuǎn)錄因子，有ESRα、ESRβ兩種亞型，它廣泛存在于各種動(dòng)物體內(nèi)，具有轉(zhuǎn)錄調(diào)控蛋白質(zhì)的功能，能影響雌激素基因在雌性脊椎動(dòng)物組織的表達(dá)與調(diào)控，從而對(duì)雌性繁殖周期中卵泡的生長(zhǎng)發(fā)育發(fā)揮作用。 本研究采用候選基因法，以中國(guó)優(yōu)良地方雞種文昌雞(n=160)作為試驗(yàn)雞群，巴布考克雞(n=99)作為對(duì)照雞群，將ESRα基因作為雞產(chǎn)蛋性狀的候選基因，根據(jù)GenBank上登陸的雞ESR

2、α序列(GenBankAccessionNo.NC006090)，設(shè)計(jì)14對(duì)引物，擴(kuò)增出ESRα基因的所有外顯子、5’側(cè)翼調(diào)控區(qū)和第1內(nèi)含子部分序列，采用PCR-SSCP方法檢測(cè)基因變異，尋找雞ESRα基因的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)(SingleNucleotidePolymorphisms，SNP)，并分析ESRα基因多態(tài)性與文昌雞產(chǎn)蛋性狀的相關(guān)性。 經(jīng)PCR-SSCP檢測(cè)發(fā)現(xiàn)文昌雞和巴布考克雞ESRα基因的整個(gè)編碼區(qū)均未出現(xiàn)多態(tài)，

3、僅在第5外顯子兩雞群有所差異?？寺y(cè)序比對(duì)后發(fā)現(xiàn)巴布考克與GenBank上的序列有1處A126G堿基差異，是一個(gè)同義突變；文昌雞有1處T128C堿基差異，導(dǎo)致編碼的氨基酸發(fā)生變化，即Leu43Ser。5’側(cè)翼調(diào)控區(qū)文昌雞檢測(cè)到兩種基因型，雜合型堿基序列有4個(gè)SNPs：A-34G，T-76C，T-79C，C-102T。第1內(nèi)含子(外顯子2上游約300bp的序列)存在多態(tài)性，其中巴布考克雞有2個(gè)SNPs位點(diǎn)，分別是：T122C，C169T。

4、文昌雞3個(gè)SNPs位點(diǎn)，分別是：T122C，A155G，C169T。A155G的堿基突變使內(nèi)含子1序列中出現(xiàn)了TCTAGATCTTC的重復(fù)序列，使150-160bp處新增了與130-140bp處的酶切位點(diǎn)完全一致的XbaⅠ、BfaⅠ、BgⅢ、BstYI、Sau3AI、DpnI等6個(gè)酶切位點(diǎn)。 群體遺傳分析表明，5’側(cè)翼調(diào)控區(qū)文昌雞的兩種基因型頻率分別為CC型0.794、CD型0.206，兩個(gè)等位基因頻率分別是C為0.897、D為

5、0.103，C等位基因在群體中占絕對(duì)優(yōu)勢(shì)。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，文昌雞群體在此突變位點(diǎn)處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。兩種基因型與產(chǎn)蛋性狀的關(guān)聯(lián)分析表明，在文昌雞的早期產(chǎn)蛋性能(開產(chǎn)日齡、開產(chǎn)蛋重、40周齡產(chǎn)蛋重、40周齡產(chǎn)蛋量)上CC型與CD型間沒有顯著差異。在內(nèi)含子1處巴布考克雞檢測(cè)到的三種基因型頻率分別為MM0.151、MN0.586、NN0.263；等位基因頻率M為0.444，N為0.556。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，巴布考克雞群體處于Har

6、dy-Weinberg平衡狀態(tài)。文昌雞三種基因型頻率分別為EE0.187、EF0.580、FF0.233；等位基因頻率E為0.477，F(xiàn)為0.523。經(jīng)χ2檢驗(yàn)，文昌雞群體處于Hardy-Weinberg平衡狀態(tài)。與產(chǎn)蛋性狀的關(guān)聯(lián)分析表明，在開產(chǎn)日齡、開產(chǎn)蛋重和40周齡產(chǎn)蛋重上三種基因型之間差異不顯著，而在40周齡產(chǎn)蛋量上EF、FF型均極顯著大于EE基因型(P＜0.01)，雜合型EF與FF基因型之間也存在顯著差異(P＜0.05)。結(jié)果表