版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進(jìn)行舉報或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡介
1、目的: 2,3,7,8-四氯二苯-對-二惡英(2,3,7,8-tetrachlorodibenzo-p-dioxin,TCDD)是地球上毒性最強(qiáng)的化合物之一,國際癌癥研究中心(International Agency forResearch on Cancer,IARC)將其列為Ⅰ級致癌物。世界衛(wèi)生組織(WHO)等機(jī)構(gòu)認(rèn)為,雖然TCDD是強(qiáng)致癌物,但就目前其暴露背景而言,TCDD的非致癌毒性作用比致癌毒性作用對人體健康危害的風(fēng)險
2、更大。此外,TCDD具有結(jié)構(gòu)穩(wěn)定、半衰期長的特性,僅需暴露一次就可以長期留存體內(nèi),長期接觸可造成體內(nèi)蓄積,造成嚴(yán)重的機(jī)體毒害作用。 由于幼鼠對TCDD高度敏感,所以本研究在雌性小鼠分娩后立即經(jīng)腹腔注射低劑量TCDD,通過乳汁對仔鼠染毒,然后觀察哺乳期暴露于TCDD對仔鼠體重增長、神經(jīng)發(fā)育和學(xué)習(xí)記憶的影響,大腦海馬和皮層組織結(jié)構(gòu)以及細(xì)胞色素P450 1A1酶(cytochrome P450 1A1,CYP1A1)、凋亡基因Bc1-
3、2(B-Cell lymphoma/leukemia 2)和Bax(Bcl-associated x protein)蛋白表達(dá)量的變化,為低劑量TCDD造成的子代慢性神經(jīng)系統(tǒng)危害及其機(jī)制提供科學(xué)依據(jù)。 方法: 1.動物模型建立與分組4 月齡健康成年昆明小鼠,雌鼠24只,雄鼠8只,按照3:1的雌雄比例同籠受孕。分娩7~10只仔鼠的保留,調(diào)整每窩仔鼠8只,雌雄對半,其余淘汰。將母鼠和仔鼠作為整體(窩)進(jìn)行完全隨機(jī)分組,設(shè)2個
4、試驗(yàn)組:4μg和2μgTCDD/kg體重組;與試驗(yàn)組對應(yīng),設(shè)2個溶劑對照組:4μg和2μg溶劑對照組;另設(shè)1個不做任何處理的空白對照組;共5組,每組3窩(5個試驗(yàn)組以下簡寫為40μg TCDD組、2μg TCDD組、4μg溶劑對照組、20μg溶劑對照組和空白對照組)。雌鼠分娩之后,立即稱重并進(jìn)行腹腔注射。母鼠哺乳仔鼠(即染毒)至仔鼠出生后第21天,而后停止哺乳,讓仔鼠自由進(jìn)食。仔鼠出生后第35天被處死。 TCDD濃度為10μ/ml(TC
5、DD/甲苯),純度為99%,腹腔注射前將該試劑用花生油稀釋,體積比為TCDD:花生油=1:4,則濃度稀釋為2μG/ml。溶劑對照為甲苯和花生油按1:4體積比混合的混合液。 2.仔鼠體重的測定 3.仔鼠神經(jīng)發(fā)育指標(biāo)的測定(平面翻正試驗(yàn)、負(fù)趨地試驗(yàn)、前肢握力試驗(yàn)、空中翻正試驗(yàn)、足展開試驗(yàn)) 4 仔鼠學(xué)習(xí)記憶能力的測定(Y迷宮試驗(yàn)) 5 采用免疫組織化學(xué)染色方法對仔鼠大腦海馬和皮層組織CYP1A1蛋白進(jìn)行定位和
6、半定量分析。 6 仔鼠大腦海馬和皮層組織細(xì)胞凋亡的測定 6.1 采用H.E染色法觀察仔鼠大腦海馬和皮層組織的結(jié)構(gòu)變化 6.2 采用免疫組織化學(xué)染色法對仔鼠大腦海馬和皮層組織Bcl-2和Bax凋亡蛋白進(jìn)行定位和半定量分析。 6.3 采用流式細(xì)胞術(shù)對仔鼠大腦海馬和皮層組織Bcl-2Bax蛋白表達(dá)量進(jìn)行定量分析 結(jié)果: 1.TCDD對仔鼠體重的影響新生仔鼠體重基本相同(P>0.05);出生后第7
7、天,20μgTCDD組仔鼠的平均體重低于其溶劑對照組和空白對照組(P<0.01);隨著TCDD的攝入和蓄積,40μg和20μg TCDD組仔鼠的平均體重均低于相應(yīng)的溶劑對照組和空白對照組(P<0.01),并且40μg TCDD組仔鼠的平均體重低于20μgTCDD組(P<0.05);停止染毒后(出生后第28天和第35天),暴露于TCDD仔鼠的平均體重依然低于相應(yīng)的溶劑對照組和空白對照組(P<0.01)。 2.TCDD對仔鼠神經(jīng)發(fā)育
8、的影響哺乳期暴露于TCDD的仔鼠的平面翻正和負(fù)趨地時間大于相應(yīng)的溶劑對照組和空白對照組,前肢握力時間和足展開距離小于相應(yīng)的溶劑對照組和空白對照組,空中翻正正確率低于相應(yīng)的溶劑對照組和空白對照組,具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。 3.TCDD對仔鼠學(xué)習(xí)記憶的影響在Y迷宮測試中,哺乳期暴露于TCDD的仔鼠獲取記憶的能力(A)、保持記憶的能力(B)和記憶保持率(C)均低于相應(yīng)的溶劑對照組和空白對照組,其差別具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01
9、.)。 4 TCDD對仔鼠大腦海馬和皮層組織CYP1A1蛋白表達(dá)量的影響CYP1A1蛋白主要表達(dá)于仔鼠大腦海馬和皮層組織錐體細(xì)胞的胞漿中。哺乳期低劑量暴露于TCDD可使仔鼠大腦錐體細(xì)胞CYP1A1蛋白的表達(dá)量增高(P<0.01),各組雌性仔鼠的CYP1A1蛋白表達(dá)量略高于雄性仔鼠,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。 5 TCDD對仔鼠大腦海馬和皮層組織細(xì)胞凋亡的影響哺乳期低劑量暴露于TCDD的仔鼠的大腦海馬和皮層組織錐
10、體細(xì)胞排列紊亂,胞體皺縮,核染色質(zhì)濃集,呈現(xiàn)細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。 凋亡基因Bcl-2主要表達(dá)于仔鼠大腦錐體細(xì)胞的胞漿中,并且存在性別差異,雌性仔鼠高于雄性(P<0.01)。哺乳期低劑量暴露于TCDD可使雌雄性仔鼠大腦錐體細(xì)胞Bcl-2蛋白的表達(dá)量減低(P<0.01),但雌性仔鼠Bcl-2蛋白表達(dá)量始終高于雄性(P<0.01)。 凋亡基因Bax主要表達(dá)于仔鼠大腦錐體細(xì)胞的胞漿和胞核中,表達(dá)量不存在性別差異(P>0.05)。哺乳期
11、低劑量暴露于TCDD可使雌雄性仔鼠大腦錐體細(xì)胞Bax蛋白的表達(dá)量增高(P<0.01),并且雌性仔鼠增高較雄性明顯,存在性別差異(P<0.05)。 TCDD可以使雌雄仔鼠大腦錐體細(xì)胞Bcl-2/Bax比值降低(P<0.01),說明TCDD可以誘導(dǎo)雌雄仔鼠海馬和皮層組織錐體細(xì)胞凋亡。并且雄性仔鼠Bcl-2/Bax比值較雌性低,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),說明雄性仔鼠比雌性的細(xì)胞凋亡率高。 結(jié)論: 1.哺乳期低
12、劑量暴露于TCDD,可以阻礙仔鼠的體重增長,并且這種阻礙作用并不隨著染毒的停止而停止,具有持續(xù)性。 2.哺乳期低劑量暴露于TCDD,可以使仔鼠的神經(jīng)反射功能下降,運(yùn)動協(xié)調(diào)能力降低,肌張力減退,神經(jīng)發(fā)育遲緩。并且接觸量越大,蓄積量越多,對神經(jīng)發(fā)育的影響越明顯。 3.哺乳期低劑量暴露于TCDD,可以使仔鼠的學(xué)習(xí)記憶能力下降,危險回避能力受損。 4 哺乳期低劑量暴露于TCDD,可以使仔鼠大腦海馬和皮層組織CYP1A1蛋
13、白表達(dá)量增加,說明血腦屏障對TCDD的阻隔作用有限,TCDD可以通過尚未發(fā)育好的血腦屏障進(jìn)入腦組織,造成海馬和皮層組織錐體細(xì)胞的損傷,這可能是TCDD導(dǎo)致子代神經(jīng)發(fā)育遲緩,學(xué)習(xí)記憶能力下降的重要途徑之一。 5 哺乳期低劑量暴露于TCDD,可以誘導(dǎo)仔鼠大腦海馬和皮層組織錐體細(xì)胞呈現(xiàn)凋亡改變,可以使Bcl-2蛋白表達(dá)量減低,Bax蛋白表達(dá)量增高,Bcl-2/Bax比值降低。Bcl-2凋亡基因家族比值的改變可能是TCDD導(dǎo)致細(xì)胞異常凋
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 哺乳期低劑量暴露2,3,7,8-四氯二苯-對-二噁英對仔鼠免疫器官CYP1A1表達(dá)和凋亡的影響.pdf
- 環(huán)境雌激素2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)對大鼠胚胎及乳鼠心臟發(fā)育的影響.pdf
- 2,3,7,8-四氯苯并二惡英(TCDD)對高脂喂養(yǎng)大鼠糖代謝和脂代謝影響研究.pdf
- 孕期及哺乳期DEHP染毒對仔鼠神經(jīng)發(fā)育的影響及機(jī)制.pdf
- 哺乳期TCDD低水平暴露對仔鼠心臟、腎臟和睪丸CYP1A1表達(dá)及凋亡的影響.pdf
- 孕期-哺乳期砷暴露對仔鼠腦組織Sema3a表達(dá)影響.pdf
- 貴金屬團(tuán)簇與四氯二苯并對二惡英相互作用及其表面增強(qiáng)研究.pdf
- 子宮內(nèi)膜異位癥小鼠模型建立及2,3,7,8-四氯二苯并二惡英對內(nèi)膜組織中細(xì)胞色素芳香化酶P450表達(dá)的影響.pdf
- 2,3,7,8-四氯二苯并二噁英所致先天性腎積水的發(fā)生機(jī)制及其預(yù)防的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 2,3,7,8-四氯二苯二噁英對HTR-8-SVneo人滋養(yǎng)細(xì)胞胰島素樣生長因子2基因表達(dá)及細(xì)胞增殖凋亡的影響.pdf
- 母鼠孕期、哺乳期補(bǔ)充魚油對仔鼠腦、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育影響的研究.pdf
- 2,3,7,8-四氯二苯并對二噁英對體外培養(yǎng)大鼠卵巢顆粒細(xì)胞E-,2-、P分泌和氧化應(yīng)激及凋亡的影響.pdf
- 哺乳期母體氯氰菊酯暴露對雄性子代生殖發(fā)育的影響.pdf
- 哺乳期磺胺間甲氧嘧啶暴露對仔鼠骨骼肌、腦發(fā)育及行為學(xué)影響.pdf
- 哺乳期甜味暴露對小鼠葉狀味蕾發(fā)育模式的影響.pdf
- 大鼠孕期、哺乳期維生素A水平對仔鼠細(xì)胞免疫功能影響的研究.pdf
- 低水平鉛暴露對發(fā)育期大鼠視網(wǎng)膜、視神經(jīng)的影響.pdf
- 小白鼠孕期、哺乳期核黃素水平對仔鼠生長發(fā)育和免疫功能影響的研究.pdf
- 藥物預(yù)防四氯二苯二噁英誘導(dǎo)胎鼠腭裂發(fā)生的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 胎兒期低水平鉛暴露對早期嬰兒發(fā)育影響的研究.pdf
評論
0/150
提交評論