OATP1B1與AML的臨床遺傳藥理學(xué)研究——人類基因組單體型圖(HapMap)的研究與應(yīng)用.pdf

1、人類基因組中的遺傳變異，是人體對(duì)藥物及其他外源性化合物產(chǎn)生不同反應(yīng)的重要原因。同時(shí)，在一定程度上，人類對(duì)大部分疾病的易感性也決定于人類基因中的各種變異。在過(guò)去的40年里，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，遺傳藥理學(xué)從一個(gè)小學(xué)科逐漸發(fā)展成為推動(dòng)臨床藥理學(xué)進(jìn)步的中堅(jiān)力量，同時(shí)也成為生物醫(yī)藥研究中一個(gè)炙手可熱的領(lǐng)域。目前，人類基因組擁有超過(guò)一千萬(wàn)個(gè)單核苷酸突變以及大量的其他類型的遺傳變異。在任何一項(xiàng)臨床研究中，只要經(jīng)費(fèi)允許，我們都可以對(duì)超過(guò)一百萬(wàn)個(gè)遺傳多

2、態(tài)性或者超過(guò)兩萬(wàn)五千個(gè)基因的表達(dá)進(jìn)行分析。盡管如此，目前這些工作仍沒(méi)能有效改變傳統(tǒng)的臨床治療模式，大部分的臨床藥物治療依然遵循經(jīng)驗(yàn)用藥模式，但轉(zhuǎn)變正在悄然進(jìn)行，相當(dāng)多的臨床醫(yī)生已經(jīng)開始在日常醫(yī)療工作中考慮基因多態(tài)性的影響，如CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6，TPMT以及VKORC1等。更明顯的是，遺傳藥理學(xué)已經(jīng)改變了臨床藥物研發(fā)的要求和模式。遺傳藥理學(xué)準(zhǔn)則已經(jīng)成為許多大型藥物臨床研究的基本要求。美國(guó)食品藥品管理局（FDA）也鼓

3、勵(lì)臨床試驗(yàn)者提供實(shí)驗(yàn)藥物的相關(guān)遺傳藥理學(xué)資料1。 自2002年開始人類基因組單體型圖計(jì)劃（InternationalHapMapProject）正式啟動(dòng)。由這項(xiàng)由美國(guó)、日本、英國(guó)、加拿大、中國(guó)和尼日利亞的科學(xué)家們合作的，從人類基因組計(jì)劃延續(xù)而來(lái)的項(xiàng)目，旨在開發(fā)一個(gè)面向公眾的，人類全基因組單體型數(shù)據(jù)庫(kù)2。該數(shù)據(jù)庫(kù)的信息將用來(lái)指導(dǎo)各種遺傳研究以及臨床表型相關(guān)的研究3。HapMap計(jì)劃所研究的DNA樣本為來(lái)自不同地域，不同種族的270

4、個(gè)個(gè)體。到Ⅱ期數(shù)據(jù)發(fā)布時(shí)，共分析了三百多萬(wàn)個(gè)SNP，分析密度達(dá)到了每1kb序列中分析1個(gè)SNP。這大概覆蓋了九百萬(wàn)到一千萬(wàn)個(gè)常見(jiàn)SNP中的25％～35％。目前，其數(shù)據(jù)也已經(jīng)可以通過(guò)互聯(lián)網(wǎng)無(wú)償獲得。 基于以上研究背景，本課題旨在查明有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)體OATP1B1的常見(jiàn)遺傳多態(tài)性對(duì)他汀類降脂藥物阿托伐他汀代謝動(dòng)力學(xué)的影響，以及通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)性抑制和非競(jìng)爭(zhēng)性抑制，改變OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)能力后，阿托伐他汀以及羅素他汀藥代動(dòng)力學(xué)的改變。此外，通

5、過(guò)嚴(yán)格設(shè)計(jì)的臨床實(shí)驗(yàn)，應(yīng)用HapMap數(shù)據(jù)庫(kù)提供的基因單體型信息，考察多基因，多遺傳變異以及多個(gè)單體型，對(duì)接受阿糖胞苷標(biāo)準(zhǔn)化療的急性髓細(xì)胞樣白血?。ˋML）患者臨床預(yù)后和藥物療效的影響進(jìn)行研究。本課題不僅為藥物反應(yīng)個(gè)體差異提供分子水平的解釋，還為臨床遺傳藥理學(xué)開辟新的研究方法和研究方向。 本課題的主要研究結(jié)果如下： 1.證實(shí)在中國(guó)健康人群中，OATP1B1單體型顯著影響阿托伐他汀在不同個(gè)體中的血藥濃度。OATP1B1*5

6、突變攜帶者與OATP1B1*1a/*1a相比，阿托伐他汀血藥濃度顯著升高； 2.發(fā)現(xiàn)單劑量口服600mg利福平，可顯著抑制阿托伐他汀的肝攝取。OATP1B1單體型顯著影響利福平對(duì)阿托伐他汀肝臟攝取的抑制效應(yīng)。利福平抑制作用在OATP1B1*1a/*1a個(gè)體中較OATP1B1*5突變攜帶者中更顯著。 3.連續(xù)14天服用熊脫氧膽酸膠囊，血漿羅素他汀及膽紅素水平顯著升高。這可能是由于熊脫氧膽酸通過(guò)抑制轉(zhuǎn)錄因子HNF1α，進(jìn)而抑

7、制OATP1B1活性所致。這種抑制水平要相對(duì)低于直接抑制OATP1B1轉(zhuǎn)運(yùn)。由于熊脫氧膽酸所抑制的轉(zhuǎn)錄因子HNF1α能參與調(diào)節(jié)多種藥物代謝酶的表達(dá)，臨床應(yīng)用熊脫氧膽酸時(shí)，應(yīng)注意可能通過(guò)此機(jī)制產(chǎn)生的多種藥物相互作用。 4.研究了參與阿糖胞苷體內(nèi)代謝的多種代謝酶（CDA，dCK），轉(zhuǎn)運(yùn)體（hCNT1）的多個(gè)單核苷酸變異以及單體型對(duì)接受阿糖胞苷標(biāo)準(zhǔn)化療的急性髓細(xì)胞樣白血病（AML）患者的總體生存率，無(wú)事件生存率，無(wú)復(fù)發(fā)生存率等臨床預(yù)后

8、指標(biāo)的影響。結(jié)果證實(shí)，hCNT1，1561C>T（rs2242046）遺傳變異，與完全緩解組AML患者的總體生存率以及藥物毒性反應(yīng)顯著相關(guān)。此外，在出現(xiàn)藥物治療失效以及治療早期死亡患者中，骨髓移植以及加用全反式維甲酸可顯著改善患者的總體生存率。 5.首次將人類基因組單體型圖（HapMap）數(shù)據(jù)應(yīng)用于臨床研究，并證實(shí)，在候選基因已知的情況下，HapMap數(shù)據(jù)庫(kù)能有效指導(dǎo)臨床遺傳藥理學(xué)研究，并提供有力的數(shù)據(jù)分析工具。 總之，