煙草鐵蛋白基因?qū)χ亟饘倏剐匝芯考捌溥z傳轉(zhuǎn)化.pdf

1、將具有卡那霉素抗性的轉(zhuǎn)煙草鐵蛋白基因(NtFer1)的T2代煙草幼苗栽于六種不同梯度濃度的金屬離子培養(yǎng)基中:(0/400/800μ mol/L)Pb2+、(0/100/200μmol/L)Cd2+、(0/75/150μmol/L) Co2+、(0/500/1000μmol/L)Zn2+、(0/50/100μmol/L)Ni2+(0/4/8mmol/L)Mn2+。生長(zhǎng)1個(gè)月后觀察轉(zhuǎn)基因群體株高、鮮重、葉綠素含量、超氧化物歧化酶(SOD)活

2、性、過氧化物酶(POD)活性和丙二醛(MDA)含量。通過統(tǒng)計(jì)分析這些生長(zhǎng)性狀和生理特性的變化情況，表明:在重金屬離子脅迫條件下，表達(dá)NtFer1基因煙草株系的各項(xiàng)生理指標(biāo)的平均水平明顯優(yōu)于非轉(zhuǎn)基因株系，能將脅迫處理中活性氧的產(chǎn)生與清除維持在一個(gè)動(dòng)態(tài)平衡范圍內(nèi)，對(duì)Pb2+、Cd2+、Mn2+、Co2+、Ni2+脅迫的耐受性優(yōu)于對(duì)照株系，說明NtFer1基因在煙草中的大量表達(dá)能提高植株對(duì)多種重金屬脅迫的自我調(diào)節(jié)適應(yīng)和防御能力，提高植株光合速

3、率、生長(zhǎng)量和保護(hù)酶活性，并抑制葉綠素分解，不同程度增強(qiáng)了轉(zhuǎn)基因煙草的抗逆能力。試驗(yàn)表明來源于煙草的NtFer1基因具有增強(qiáng)轉(zhuǎn)基因株系抗氧化能力，提高轉(zhuǎn)基因植物抗多種重金屬污染功能。
　　楊樹生長(zhǎng)穩(wěn)定，不僅用于改善生態(tài)環(huán)境，維護(hù)生態(tài)平衡，實(shí)現(xiàn)林業(yè)的可持續(xù)發(fā)展，而且還具有重要的工業(yè)用途，是膠合板，包裝材料，造紙等的重要原材料。利用根瘤農(nóng)桿菌(Agrobactrium tumefaciens)介導(dǎo)的葉盤法將NtFer1基因?qū)肷叫聴?P

4、.davidiana×P..bolleana)基因組，培育轉(zhuǎn)基因山新楊。對(duì)具有卡那霉素抗性的轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行PCR-Southern檢測(cè)和Northern雜交，分析表明，NtFer1基因已整合到山新楊基因組，并且表達(dá)正確。
　　利用綠色植物清除土壤中的重金屬污染是近幾年資源與環(huán)境領(lǐng)域發(fā)展起來的研究熱點(diǎn)。植物修復(fù)不僅是一條綠色的凈化途徑，也是一種經(jīng)濟(jì)有效、符合大眾需求的節(jié)約型原位綠色技術(shù)，不僅能回收金屬而被再利用，而且能保持土壤結(jié)構(gòu)和

5、微生物生物活性。隨著對(duì)植物修復(fù)機(jī)制的深入研究，對(duì)新的可更好地抵抗重金屬的基因的鑒定和克隆，并通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)創(chuàng)造一批新的植物品種，研究超積累植物的抗性機(jī)理，篩選出能同時(shí)吸收幾種重金屬污染物的植物，將基因工程技術(shù)結(jié)合到植物修復(fù)技術(shù)中，培育出高效富集多種重金屬的轉(zhuǎn)基因植物，這將成為未來一段時(shí)間內(nèi)的主要研究方向。工業(yè)生產(chǎn)中往往使用多種金屬作為原料，使得一個(gè)地區(qū)的污染很少是由單一的一種重金屬造成，運(yùn)用基因工程手段改造植物生理特性、提高其對(duì)重金屬抗