乙酰膽堿酯酶活性中心狹隙開口的原子力顯微觀察.pdf

1、乙酰膽堿酯酶(AChE)是膽堿能神經(jīng)系統(tǒng)重要的酶,AChE的作用機理一直是生命科學(xué)的重要課題.原子力顯微技術(shù)(AFM)作為一門新發(fā)展起來的技術(shù),提供了人們認(rèn)識酶的結(jié)構(gòu)與功能的又一新的窗口.該實驗利用原子力顯微鏡(AFM)觀察研究了 重組于生物膜上的正常乙酰膽堿酯酶分子和與底物乙酰膽堿(ACh)反應(yīng)后酶蛋白的分子結(jié)構(gòu),進一步從乙酰膽堿酯酶結(jié)構(gòu)變化睚開究其作用機制.主要結(jié)果:利用AFM成像可以觀察到正常AChE表面平滑,邊界清晰,中間突出,

2、略呈橢圓球體,三維顯示表現(xiàn)為火山狀;與乙酰膽堿作用后,蛋白顆粒直徑增大,并且出現(xiàn)成環(huán)狀態(tài)改變.酶蛋白表面變得粗糙,邊界模糊,形態(tài)也變得不甚規(guī)則,蛋白顆粒中心出現(xiàn)近圓形孔洞.三維顯示表現(xiàn)為火山口狀.初步認(rèn)為這種近圓形孔洞是AChE活懷中心狹隙的開口.AChE活性中心狹隙開口具有兩種狀態(tài):即并閉和開放狀態(tài)或狹窄和增寬狀態(tài).在未與AChE反應(yīng)時,它處于關(guān)閉或狹窄狀態(tài);在突觸末梢釋放ACh,作用于AChE后,AChE活性中心狹隙開放或者增寬,以