雞矢藤環(huán)烯醚萜苷對(duì)大鼠尿酸性腎病的防治作用及機(jī)制研究.pdf

1、尿酸性腎病(Uric acid nephropathy,UAN)又稱(chēng)痛風(fēng)性腎病,是由于血尿酸生成過(guò)多或尿尿酸排泄減少致血中尿酸升高而引起的腎臟損害。本課題所用藥物雞矢藤環(huán)烯醚萜苷(Iridiod Glycosides from Paederia Scandens,IGPS)是從藥用植物雞矢藤中提取的一類(lèi)有效成分,其主要活性成份為雞矢藤苷、雞矢藤次苷及車(chē)葉草苷。我們的前期研究結(jié)果顯示,IGPS可以有效降低高尿酸血癥模型動(dòng)物的血尿酸水平、改

2、善尿酸性腎病大鼠的炎癥反應(yīng)。本課題進(jìn)一步研究了IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠的防治作用及其可能的作用機(jī)制。
　　主要實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下:
　　1、尿酸性腎病大鼠的制備及IGPS的防治作用
　　采用灌胃給予尿酸前體物質(zhì)酵母膏(15g/kg,ig,bid×42d)和腹腔注射尿酸氧化酶抑制劑氧嗪酸鉀(250mg/kg,ip,qw×6w)聯(lián)合應(yīng)用的方法制備大鼠UAN模型。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中每天觀察各組大鼠的毛色、神態(tài)、攝食量、進(jìn)水量、尿量和行為活

3、動(dòng)度等一般情況;分別于造模0d、7d、14d、28d、35d和42d檢測(cè)大鼠的體重變化情況;使用無(wú)創(chuàng)血壓儀檢測(cè)各組大鼠0～6周的血壓變化情況;造模第8d起每天上下午灌胃造模的同時(shí),下午各用藥組分別給予IGPS(280、140、70mg/kg)及別嘌呤醇(50mg/kg)灌胃給藥,每天一次,直至造模結(jié)束。造模42d后檢測(cè)各組大鼠血尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、血肌酐(Cre),收集24h尿液,計(jì)算尿酸分級(jí)排泄率;取腎臟,計(jì)算腎指數(shù);常規(guī)

4、HE染色,觀察腎臟的病理變化。
　　結(jié)果：顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可明顯改善UAN大鼠的一般癥狀,可增加大鼠體重,抑制血壓升高,降低血尿酸含量,改善腎功能,升高尿酸分級(jí)排泄率,降低腎指數(shù)。腎臟光鏡的病理結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可減少腎組織內(nèi)尿酸鹽沉積,減輕腎臟組織的炎性細(xì)胞浸潤(rùn)及纖維化程度。提示IGPS對(duì)酵母膏和氧嗪酸鉀所致UAN具有較好的防治作用。<

5、br>　　2、IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠的防治作用機(jī)制
　　2.1、IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠血壓的影響
　　采用無(wú)創(chuàng)血壓儀測(cè)定大鼠0～6周的血壓變化情況,每周測(cè)兩次。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可顯著抑制UAN大鼠血壓的升高。免疫組化研究也發(fā)現(xiàn),模型組大鼠腎組織NOS-1幾乎未見(jiàn)表達(dá),IGPS高、中劑量組NOS-1表達(dá)顯著增加,表明藥物可明顯增強(qiáng)NOS-1活性,從而抑制大鼠血壓的升高。提示

6、IGPS抑制UAN大鼠血壓的升高可能是它發(fā)揮對(duì)腎臟保護(hù)作用的重要原因。
　　2.2、IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠尿酸代謝的影響
　　采用磷鎢酸法測(cè)定各組大鼠尿液尿酸、尿肌酐;測(cè)定各組大鼠尿液容積,并計(jì)算各組大鼠尿酸分級(jí)排泄率。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可顯著提高UAN大鼠尿液尿酸水平,IGPS(280mg/kg,ig,qd×35d)可顯著提高UAN大鼠尿液肌酐水平和尿液容積,IGPS(28

7、0、140mg/kg,ig,qd×35d)可促進(jìn)UAN大鼠的尿酸分級(jí)排泄。提示IGPS降血尿酸的作用可能與促進(jìn)UAN大鼠的尿酸分級(jí)排泄有關(guān)。
　　2.3、IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠腎臟組織炎癥因子的影響
　　采用免疫組化法檢測(cè)UAN大鼠腎臟組織COX-2及TNF-α蛋白表達(dá);采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)法檢測(cè)TNF-αmRNA表達(dá)。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可顯著降低UAN大

8、鼠腎臟組織COX-2及TNF-α蛋白的表達(dá),且下調(diào)TNF-αmRNA的表達(dá)。表明IGPS可有效保護(hù)炎癥因子介導(dǎo)的腎臟損傷,這可能是它發(fā)揮對(duì)腎臟保護(hù)作用的又一重要機(jī)制。
　　2.4、IGPS對(duì)尿酸性腎病大鼠腎臟組織纖維化的影響
　　采用免疫組化法檢測(cè)腎組織TGF-β1表達(dá);采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)法檢測(cè)TGF-β1mRNA表達(dá)。結(jié)果顯示,IGPS(280、140mg/kg,ig,qd×35d)可抑制UAN大鼠腎小管間質(zhì)TGF-