大蒜素誘導人上皮性卵巢癌耐順鉑SKOV-3-DDP細胞凋亡及其機制研究.pdf

1、學位論文獨創(chuàng)性盧明學位論文獨創(chuàng)性聲明本人聲明所呈交的學位論文是本人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得南昌大學或其他教育機構的學位或證書而使用過的材料。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確的說明并表示謝意。學位論文作者簽名( 手寫) ：炙位蘭簽字日期： 山／綽易月／莎日學位論文版權使用授權書本學位論文

2、作者完全了解南昌大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，有權保留并向國家有關部門或機構送交論文的復印件和磁盤，允許論文被查閱和借閱。本人授權南昌大學可以將學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據庫進行檢索，可以采用影印、縮印或掃描等復制手段保存、匯編本學位論文。同時授權中國科學技術信息研究所和中國學術期刊( 光盤版) 電子雜志社將本學位論文收錄到《中國學位論文全文數(shù)據庫》和《中國優(yōu)秀博碩士學位論文全文數(shù)據庫》中全文發(fā)表，并通過網絡向社會公眾提供信

3、息服務。( 保密的學位論文在解密后適用本授權書)學位論文作者簽名( 手寫) ：象乍蘭 導師簽名( 手寫) ：簽字日期：2 - o ／> 年 易月 ，護日 簽字日期：刃／≯年 多月／D 日摘要摘 要 煳㈣一目的：利用體外培養(yǎng)的人上皮性卵巢癌耐順鉑細胞株S K O V - 3 ／D D P 細胞，探討大蒜素( D T ) 單用或與順鉑( D D P ) 聯(lián)用對S K O V - 3 ／D D P 細胞的增殖抑制及誘導其細胞凋亡的分子機

4、制，為臨床上耐順鉑卵巢癌的治療提供實驗依據。方法：體外培養(yǎng)的S K O V 一3 ／D D P 細胞，實驗隨機分為①正常對照組：②大蒜素作用組( 終濃度分別為5 、1 0 、2 0 、4 0L t g ／m 1 ) ；③J i N 車n 作用組( 終濃度分別為5 、1 0 、2 0 、4 0p ．g ／m 1 ) ；④大蒜素聯(lián)合順鉑組( 于培養(yǎng)基中加入終濃度2 0 ¨g ／m l 大蒜素和終濃度5p g ／m l 順鉑) 。M

5、 T T 法檢測S K O V 一3 ／D D P 細胞的生長抑制作用；分別采用普通光學顯微鏡、G i e m s a 染色和熒光顯微鏡觀察S K O V 一3 ／D D P 細胞形態(tài)變化；流式細胞術檢測細胞凋亡率，分光光度法測C a s p a s e 一3 活性變化；R T —P C R和W e s t e r nb l o t 分別檢測凋亡相關基因P U M A 、B a x 、B c l ．2 和B c l —x l 的m R

6、N A及蛋白的表達變化。結果：1 、大蒜素和順鉑分別對S K O V - 3 ／D D P 細胞增殖有一定的抑制作用，且呈明顯的濃度一時間依賴性。不同濃度的大蒜素和順鉑分別作用后光密度值與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義( P < O ．0 5 或P < 0 ．0 1 ) 。但相同時間相同劑量下大蒜素組對S K O V - 3 ／D D P 細胞的光密度值明顯低于順鉑組( 尸< 0 ．0 5 或P < 0 ．0 1

7、) ，說明大蒜素對S K O V _ 3 ／D D P 細胞抑制作用優(yōu)于順鉑。2 、大蒜素聯(lián)合順鉑應用對S K O V - 3 ／D D P 細胞抑制率明顯高于各自單獨用藥( P < 0 ．0 1 ) 。大蒜素和順鉑聯(lián)合用藥具有協(xié)同效應。3 、大蒜素組和大蒜素聯(lián)合順鉑處理組中可觀察到細胞凋亡所特有的典型形態(tài)學特征4 、大蒜素能誘導S K O V - 3 ／D D P 細胞凋亡，顯著提高細胞凋亡率，其中4 0j ．t g ／m l

8、大蒜素4 8 h 作用細胞早期凋亡率( 2 5 ．7 士4 ．4 1 ) ％顯著高于正常對照組( 4 ．5 土1 ．1 2 ) ％( 尸< 0 ．0 1 ) ；大蒜素聯(lián)合順鈾處理組誘導S K O V - 3 ／D D P 細胞的早期凋亡的作用優(yōu)于兩者單純用藥( P < 0 ．0 5 或P < 0 ．0 1 ) ，具有協(xié)同作用。5 、大蒜素能提高C a s p a s e 一3 活性，4 0p g ／m l 大蒜素4 8