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1、目的:用不同濃度大蒜素和順鉑作用于體外培養(yǎng)的人上皮性卵巢癌耐順鉑細(xì)胞株(SKOV-3/DDP),觀察細(xì)胞株的生長(zhǎng)情況及其超微結(jié)構(gòu)和細(xì)胞周期的改變,探討大蒜素對(duì)體外培養(yǎng)的人上皮性卵巢癌耐順鉑細(xì)胞株(SKOV-3/DDP)的作用,以期為臨床治療耐順鉑上皮性卵巢癌患者提供新的輔助治療方案。 方法:體外培養(yǎng)人上皮性卵巢癌耐順鉑細(xì)胞株SKOV-3/DDP,細(xì)胞生長(zhǎng)至對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期后,調(diào)整細(xì)胞密度為5×104/ml置于24孔板中培養(yǎng),測(cè)細(xì)胞的生
2、長(zhǎng)曲線(xiàn),用MTT法檢測(cè)不同濃度(0.625~50μg/ml)的大蒜素和不同濃度(0.625~50μg/ml)的順鉑對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞株的增殖抑制作用,用透射電子顯微鏡觀察大蒜素作用后SKOV-3/DDP細(xì)胞的超微結(jié)構(gòu),用流式細(xì)胞儀檢測(cè)大蒜素作用后SKOV-3/DDP細(xì)胞的細(xì)胞周期的改變。 結(jié)果: (1)體外培養(yǎng)的SKOV-3/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn):觀察SKOV-3/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線(xiàn),前5天,細(xì)胞增殖活躍,第5
3、天后細(xì)胞增殖進(jìn)入平臺(tái)期。 (2)大蒜素對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞增殖的影響:大蒜素對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞的生長(zhǎng)有明顯的抑制作用,且呈劑量和時(shí)間依賴(lài)性,順鉑對(duì)SKOV3/DDP細(xì)胞體外生長(zhǎng)亦呈現(xiàn)時(shí)間-劑量依賴(lài)關(guān)系,不同濃度的大蒜素作用后光密度值(OD值)與對(duì)照組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),OD值可間接反映活細(xì)胞的數(shù)量,OD值越低,藥物對(duì)細(xì)胞的抑制率越高。同一濃度的大蒜素作用不同時(shí)間后的OD值比較差異亦
4、有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),而相同濃度的大蒜素和順鉑作用相同時(shí)間后的OD值比較,大蒜素組的OD值均明顯低于順鉑組的OD值,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),大蒜素對(duì)SKOV-3/DDP的抑制率也高于順鉑,并隨時(shí)間的延長(zhǎng)而增加。 (3)大蒜素對(duì)SKOV-3/DDP細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的影響:25μg/ml的大蒜素作用24h,可誘導(dǎo)SKOV-3/DDP細(xì)胞發(fā)生凋亡,電鏡下可見(jiàn)典型的凋亡細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變。 (4)大蒜素對(duì)
5、SKOV-3/DDP細(xì)胞周期的影響:流式細(xì)胞儀分析發(fā)現(xiàn)與對(duì)照組比較,12.5μg/ml的大蒜素作用24h、48h、72h后G2/M期細(xì)胞減少,G0/G1期細(xì)胞明顯增加,且呈時(shí)間依賴(lài)性,提示SKOV-3/DDP細(xì)胞經(jīng)大蒜素處理后細(xì)胞周期阻滯于G0/G1期。 結(jié)論: (1)大蒜素和順鉑均能抑制體外培養(yǎng)的人上皮性卵巢癌耐順細(xì)胞株SKOV-3/DDP的生長(zhǎng),抑制作用呈時(shí)間-劑量依賴(lài)關(guān)系,大蒜素對(duì)SKOV-3/DDP的抑制率高于順
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