大鼠心肺復(fù)蘇后腦水通道蛋白4 mRNA的表達(dá)及七葉皂苷的干預(yù)研究.pdf

1、目的： 制作研究窒息致大鼠心臟驟停模型并針對(duì)該模型的構(gòu)建過(guò)程進(jìn)行探討；采用該心肺復(fù)蘇模型，通過(guò)觀察大鼠心肺復(fù)蘇后不同時(shí)間腦組織水含量、水通道蛋白4mRNA表達(dá)的變化，研究心臟驟停后腦水腫和水通道蛋白4的關(guān)系，探討心臟驟停后腦損傷機(jī)制。最后用七葉皂苷作為藥物干預(yù)，對(duì)腦水腫的治療作一實(shí)驗(yàn)性探索。 方法： 103只Sprague-Dawley(SD)大鼠，被用來(lái)進(jìn)行構(gòu)建窒息致心臟驟停模型的研究。觀察研究動(dòng)物的平均動(dòng)脈壓

2、、ETC02、神經(jīng)功能評(píng)分、麻醉等情況。再?gòu)慕３晒Σ⒎衔覀冎贫ǖ臉?biāo)準(zhǔn)化條件的大鼠中，隨機(jī)選取64只分成復(fù)蘇組(按時(shí)間點(diǎn)分為ROSC后1/2小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)組)和藥物組(按時(shí)間點(diǎn)分為ROSC后1/2小時(shí)、3小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)組)，每組8只大鼠。同時(shí)每個(gè)時(shí)間點(diǎn)均設(shè)立手術(shù)對(duì)照組做為對(duì)比，另外將32只大鼠隨機(jī)分入這四組，每組也是8只動(dòng)物。藥物組在復(fù)蘇成功達(dá)到ROSC后即刻給藥。各組動(dòng)物達(dá)到規(guī)定時(shí)間后處死后取大腦組織，用干-

3、濕比重法測(cè)定復(fù)蘇早期各時(shí)點(diǎn)腦組織含水量，RT-PCR法半定量研究腦組織Aquaporin-4的基因表達(dá)情況。 結(jié)果： 1.參加本實(shí)驗(yàn)大鼠103只，ROSC率79.8％。所有大鼠在窒息7min后心臟均已完全停搏。氣胸成為本實(shí)驗(yàn)常見的并發(fā)癥。復(fù)蘇成功和失敗組ETCO2平均值在復(fù)蘇開始后第10、15分鐘差異高度顯著(P<0.01)，可以做為預(yù)測(cè)復(fù)蘇成功率的一個(gè)輔助指標(biāo)。 2.與手術(shù)對(duì)照組相比，復(fù)蘇組ROSC后1/2小時(shí)

4、起就出現(xiàn)腦組織水含量的明顯增加(P<0.01)，并持續(xù)增長(zhǎng)至12小時(shí)(P<0.01)。而與手術(shù)對(duì)照組相比，復(fù)蘇組ROSC后1/2小時(shí)大鼠腦組織AQP4mRNA的表達(dá)水平就開始上升(P<0.05)，之后持續(xù)性上升至12小時(shí)(P<0.01)。統(tǒng)計(jì)表明復(fù)蘇后腦水含量與AQP4mRNA的表達(dá)呈正直線相關(guān)。 3.與手術(shù)對(duì)照組相比，藥物組在ROSC后1/2小時(shí)、3小時(shí)出現(xiàn)腦組織水含量的增加(P<0.01)，但在6小時(shí)和12小時(shí)又有所下降，與

5、手術(shù)對(duì)照組比較差異無(wú)顯著性(P>0.05)。腦組織AQP4mRNA的表達(dá)也同樣在ROSC后1/2小時(shí)、3小時(shí)增強(qiáng)(P<0.01)，之后在6小時(shí)、12小時(shí)檢測(cè)值又有下降，與手術(shù)對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。 結(jié)論： 1.窒息致大鼠心臟驟停模型是較為理想的心肺復(fù)蘇實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?2.心臟驟停后腦水腫的發(fā)生跟水通道蛋白4mRNA表達(dá)上調(diào)有關(guān)。 3.七葉皂苷能減輕心臟驟停后腦水腫，通過(guò)下調(diào)水通道蛋白4mRNA