肝干細(xì)胞的磁粒子標(biāo)記和MR示蹤研究.pdf

1、研究目的；應(yīng)用磁性氧化鐵納米粒子和多聚賴氨酸(Poly-L-Lysine PLL)的偶聯(lián)物Fe<,2>O<,3>-PLL，體外標(biāo)記人臍血間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells，MSCs)和大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone mesenchymal stem cells，BMSCs)，磁共振進(jìn)行標(biāo)記細(xì)胞成像。 方法 制備Fe<,2>O<,3>-PLL，分離人臍血MSCs和BMSCs進(jìn)行純化并傳代培養(yǎng)，標(biāo)記

2、Fe<,2>O<,3>-PLL，普魯氏藍(lán)染色顯示細(xì)胞內(nèi)鐵，原子吸收光譜儀進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)鐵定量，四氮噻唑藍(lán)(MTT)雙色試驗(yàn)評(píng)價(jià)不同濃度Fe<,2>O<,3>-PLL標(biāo)記MSCs后對(duì)細(xì)胞生長狀況的影響，Annexin/PI雙染色法檢測細(xì)胞凋亡，應(yīng)用MR的T<,1>WI、T<,2>WI、T<,2.*wI三序列進(jìn)行細(xì)胞群成像。 結(jié)果 普魯氏藍(lán)染色清晰顯示藍(lán)色鐵顆粒位于MSCs胞漿內(nèi)，原子吸收光譜儀示細(xì)胞內(nèi)鐵含量(64.51±10.

3、32)pg，MTT比色試驗(yàn)示5μg/ml至200μg/ml等7個(gè)鐵濃度組Fe<,2>O<,3>-PLL標(biāo)記后細(xì)胞的光吸收值與未標(biāo)記MSCs比較，各組間總體比較差異無顯著性(Kruskal．Wallis秩和檢驗(yàn)，X<'2>=10.35，P=0.17)。標(biāo)記MSCs時(shí)，鐵濃度采用20～25μg/ml較合適。標(biāo)記MSCs、未標(biāo)記MSCs晚期凋亡及壞死細(xì)胞分別為4.01±1.76﹪，2.98±1.37﹪；早期凋亡細(xì)胞分別為10.34±0.43﹪

4、，11.36±1.30﹪，兩者間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義p>.05)．在MR的T<,2>WI、T<,2>*WI中，1x10<'6>個(gè)標(biāo)記MSC<,s>(1天、8天)、5×10<'5>個(gè)標(biāo)記MSCs較未標(biāo)記MSCs均有信號(hào)降低改變，差異在T<,2>*WI有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<.05)，1×10<'6>個(gè)標(biāo)記MSCs標(biāo)記后培養(yǎng)8天的信號(hào)強(qiáng)度變化率均較7天前下降，在T<<2>*WI中差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<.05)。三序列中以T<,2>*WI的信號(hào)強(qiáng)度變化