細胞凋亡與細胞周期的協(xié)同及分子機制研究.pdf

1、第一部分 細胞凋亡與增殖的協(xié)同現(xiàn)象在人類培養(yǎng)細胞中的模式 背景和目的:細胞凋亡和細胞周期機制是相互聯(lián)結在一起的,但是,細胞周期進程中細胞凋亡的規(guī)律和模式還沒有完整的描述.方法:該研究中我們用一種新的細胞凋亡和細胞周期同步分析方法(API法)來檢測各種細胞內外凋亡信號途徑誘導劑所致的細胞周期特異性細胞凋亡.PHA刺激的外周血淋巴細胞作為細胞周期進程的模型.第二部分:G1期MOLT-4細胞凋亡與Bcl-2蛋白磷酸化的細胞周期特異性 目的:以

2、X線誘導的G1期MOLT-4細胞凋亡為模式,研究Bcl-2蛋白磷酸化有無細胞周期特異性,探討細胞周期時相特異性細胞凋亡的發(fā)生機制.方法:X線照射誘導MOLT-4細胞發(fā)生凋亡,瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA片段化現(xiàn)象.API法檢測細胞凋亡的細胞周期特異FLICA檢測Caspase3激活.Roscovitine抑制CDKs的活性.用流式細胞儀分選各個細胞周期時相的細胞群,蛋白免疫印跡檢測Bcl-2蛋白的細胞周期特異性表達.第三部分 Cyclin