MiR-21對人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的作用及其機(jī)理研究.pdf

1、目的： 觀察miR-21對人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖及凋亡的影響，探討miR-21的生物學(xué)功能，并對其作用機(jī)理做更深入的研究，尋找診斷、治療膠質(zhì)瘤的新方法和途徑。 方法： 體外化學(xué)合成anti-miR-21，采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法導(dǎo)入膠質(zhì)瘤U87細(xì)胞系中，應(yīng)用cck-8法及流式細(xì)胞術(shù)檢測其對U87細(xì)胞增殖及凋亡的影響；應(yīng)用實時熒光定量PCR檢測轉(zhuǎn)染后PDCD4和PTEN的mRNA水平；應(yīng)用Western blot檢測PDC

2、D4和PTEN基因蛋白表達(dá)。 結(jié)果： 抑制miR-21后對U87細(xì)胞的生長具有抑制作用，促進(jìn)了細(xì)胞凋亡；轉(zhuǎn)染anti-miR-21后PDCD4和PTEN mRNA和對照組相比無明顯變化；miR-21基因抑制后PDCD4和PTEN基因的蛋白表達(dá)增高。 結(jié)論： 應(yīng)用RNA干擾技術(shù)在轉(zhuǎn)染anti-miR-21后出現(xiàn)腫瘤細(xì)胞的生長阻滯，誘導(dǎo)凋亡，表明miR-21起到了一個類似癌基因的作用，使miR-21基因沉默后