+Gz暴露對冠狀動脈不同程度狹窄豬血漿C反應蛋白、內(nèi)皮素-1及其心肌組織血管內(nèi)皮生長因子變化的影響研究.pdf

1、第一部分：
　　目的：觀察＋Gz暴露處理后不同冠狀動脈狹窄程度豬的血漿 C反應蛋白（C-reactive protein,CRP）和內(nèi)皮素-1(endothelin-1,ET-1)水平的變化特點。
　　方法：①采用抽簽法隨機將25頭巴馬小型豬分為冠狀動脈狹窄組(20頭)、假手術(shù)組（5頭）。在胸腔鏡直視下手術(shù)絲線永久性結(jié)扎狹窄組小型豬的左前降支近端，建立輕度（狹窄程度≤50％，7頭），中度（狹窄程度51%～70%，6頭）和重度

2、（狹窄程度≥70%，7頭，其中2頭于術(shù)后死亡）狹窄的冠狀動脈狹窄模型。②予氯胺酮肌注麻醉的狹窄組和假手術(shù)組小型豬（總計23頭）首先依次在中國航天員科研訓練中心研制的98型離心機上進行+3 Gz/10s的預適應處理，間隔5-10分鐘后，開始分別正式進入+Gz環(huán)境暴露。初始+3 Gz，G值增長率1G/s，每次暴露總時長60s（其中包括加速期、平臺期及減速期，平臺期持續(xù)約10s），每次暴露時間間隔10 min，＋Gz強度最高不超過+9 Gz。

3、在+3 Gz～+9 Gz的暴露環(huán)境下，以心電波提示ST段壓低或T波倒置，靜息2分鐘后仍未恢復，或同一導聯(lián)心電監(jiān)護出現(xiàn)3次以上的室性期前收縮或者室顫等作為停止＋Gz暴露的標準（未出現(xiàn)者繼續(xù)進行下一強度的＋Gz暴露處理），記錄其最大＋Gz耐受值。③分別于暴露前及其最大耐受＋Gz暴露后1 min留取靜脈血和分離血漿，采用雙抗體夾心ABC-ELISA法測定CRP及ET-1的含量。
　　結(jié)果：①各組小型豬最大＋Gz加速度耐受值分別為正常組：

4、＋(8.600±0.548)Gz；輕度狹窄組：＋(7.430±0.976)Gz；中度狹窄組：＋(5.830±1.169)Gz；重度狹窄組：＋(4.000±0.707)Gz。各組間最大＋Gz加速度耐受值采用Kruskal Wallis秩和檢驗法進行比較，結(jié)果示各組最大＋Gz加速度耐受值不完全相同（X2=17.405，P=0.001）。分別采用Mann-Whitney U檢驗及Bonferroni法對正常組和狹窄組、狹窄組組間進行兩兩比較后

5、發(fā)現(xiàn)，正常組與輕度狹窄組最大＋Gz加速度耐受值之間無顯著性差異（p>0.05），其余各組之間差異顯著（p<0.05）。②采用兩因素重復測量資料的協(xié)方差分析法（以最大＋Gz加速度耐受值作為協(xié)變量）對豬血漿CRP及ET-1在最大耐受＋Gz加速度暴露處理前后的水平進行分析，結(jié)果示，最大耐受＋Gz暴露處理前后血漿CRP及ET-1的差異均存在統(tǒng)計學意義（F＝12.223、7.827，p<0.05）；冠狀動脈不同程度狹窄組間CRP及ET-1的差異均

6、存在統(tǒng)計學意義（F＝7.656、7.755，p<0.01）。采用Bonferroni法對各組組間血漿CRP和ET-1的水平、暴露前后CRP及ET-1的增長幅度進行兩兩比較，發(fā)現(xiàn)冠狀動脈中度和重度狹窄模型豬血漿CRP和ET-1的水平、暴露前后CRP及ET-1的增長幅度較正常組明顯升高（p＜0.05）；輕度狹窄組與正常組相比無顯著性差異（p>0.05）。CRP和ET兩個指標測量時點與冠狀動脈狹窄程度之間具有的交互作用（F＝0.913、0.8

7、21，p>0.05）及其二者與最大耐受＋Gz值之間具有的交互作用（F＝2.541、3.050，p>0.05）均不存在統(tǒng)計學意義。③最大耐受＋Gz加速度暴露處理后CRP及ET-1的水平呈現(xiàn)顯著的直線相關(guān)關(guān)系（r＝0.977，p<0.01）。
　　結(jié)論：①各組小型豬最大＋Gz加速度耐受值與冠狀動脈狹窄程度有關(guān)，伴隨著冠狀動脈狹窄程度的加重，最大＋Gz加速度耐受值逐漸降低。②＋Gz暴露可顯著提高各組小型豬血漿CRP和ET-1的水平。③＋

8、Gz暴露對冠狀動脈不同程度狹窄小型豬血漿CRP和ET-1水平的影響不同，狹窄程度越重，影響越大。④輕度狹窄模型豬在＋Gz暴露下血漿CRP和ET-1的濃度改變與正常組相似。提示+Gz暴露處理后，伴隨著冠脈狹窄程度的加重，各狹窄組動脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性逐漸降低，而輕度狹窄組則擁有與假手術(shù)組相似的粥樣硬化斑塊穩(wěn)定性。
　　第二部分：
　　目的：觀察＋Gz暴露處理后不同冠狀動脈狹窄程度豬的心肌組織中血管內(nèi)皮生長因子（vascula

9、r endothelial growth factor，VEGF）的表達。
　　方法：①采用抽簽法隨機將25頭巴馬小型豬分為冠狀動脈狹窄組(20頭)、假手術(shù)組（5頭）。在胸腔鏡直視下手術(shù)絲線永久性結(jié)扎狹窄組小型豬的左前降支近端，建立輕度（狹窄程度≤50%，7頭），中度（狹窄程度51%～70%，6頭）和重度（狹窄程度≥70%，7頭，其中2頭于術(shù)后死亡）狹窄的冠狀動脈狹窄模型。②予氯胺酮肌注麻醉的狹窄組和假手術(shù)組小型豬（總計23頭）首

10、先依次在中國航天員科研訓練中心研制的98型離心機上進行+3 Gz/10s的預適應處理，間隔5-10分鐘后，開始分別正式進入+Gz環(huán)境暴露。初始+3 Gz，G值增長率1G/s，每次暴露總時長60s（其中包括加速期、平臺期及減速期，平臺期持續(xù)約10s），每次暴露時間間隔10 min，＋Gz強度最高不超過+9 Gz。在+3 Gz～+9 Gz的暴露環(huán)境下，以心電波提示ST段壓低或T波倒置，靜息2分鐘后仍未恢復，或同一導聯(lián)心電監(jiān)護出現(xiàn)3次以上的室

11、性期前收縮或者室顫等作為停止＋Gz暴露的標準（未出現(xiàn)者繼續(xù)進行下一強度的＋Gz暴露處理），記錄其最大＋Gz耐受值。③各組小型豬分別于其最大耐受＋Gz暴露處理后，予40ml10%氯化鉀快速靜脈注射處死并速取左心室前壁心肌制成石蠟切片，應用免疫組織化學SP法和顯微圖像定量分析法觀察各冠脈狹窄小型豬心肌組織VEGF蛋白的表達情況。
　　結(jié)果：最大耐受＋Gz暴露處理后，①假手術(shù)組和狹窄組小型豬VEGF蛋白陽性表達，且主要定位于細胞漿。②

12、VEGF蛋白染色強度：假手術(shù)組與輕度狹窄組(+)，中度狹窄組(++)，重度狹窄組(+++)。③伴隨著冠狀動脈狹窄程度的加重，狹窄組小型豬VEGF蛋白表達的光密度值及面積密度值有不斷增加的趨勢（P＜0.05）。④輕度狹窄組與假手術(shù)組相比，光密度值及面積密度值均無顯著性差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：最大耐受＋Gz暴露處理后，①各狹窄組小型豬心肌組織VEGF蛋白的表達量呈遞增的趨勢。②輕度狹窄模型豬心肌組織VEGF蛋白的表達量與假手