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文檔簡介
1、目的:⑴探討七氟烷對新生大鼠(7日齡 SD大鼠)學(xué)習(xí)記憶能力及乙酰膽堿酯酶活性、α7-nAChR(煙堿型乙酰膽堿受體)表達(dá)的影響。⑵為臨床安全使用七氟烷提供相關(guān)參考。
方法:30只7日齡SD大鼠,體重10-15g,雌雄不拘,隨機分為C、A、B三組,每組10只:①C組為對照組,分為C1和C2組,各組5只。均在特制有機玻璃箱內(nèi)吸入氧氣4h后,C1組立即處死,取海馬組織備用,C2組飼養(yǎng)至21d時進(jìn)行行為學(xué)實驗。②A組為實驗組,分為A
2、1和A2組,各組5只。均在特制有機玻璃箱內(nèi)吸入七氟烷4h后,A1組立即處理,取海馬組織備用,A2組飼養(yǎng)至21d時進(jìn)行行為學(xué)實驗。③B組為乙酰膽堿酯酶活性組,分為B1和B2組,B1組在特制有機玻璃箱內(nèi)吸入氧氣4h,B2組在特制有機玻璃箱內(nèi)吸入七氟烷4h,實驗處理后處死B組所有大鼠,取海馬備用。④C1、A1組使用Trizol一步法提取海馬組織總RNA,Real-time PCR方法測定α7-nAChR表達(dá)含量。提取海馬組織總蛋白,BCA法進(jìn)
3、行蛋白定量,用蛋白免疫印跡(Western Blotting)法分別檢測C1、A1組α7-nAChR蛋白的表達(dá)情況。⑤使用比色法觀察C1組和C2組乙酰膽堿酯酶活性。⑥C2、A2組大鼠飼養(yǎng)至21d齡時采用跳臺儀觀察學(xué)習(xí)記憶能力改變情況。
結(jié)論:⑴發(fā)育早期大鼠急性暴露于2.3%七氟烷4小時后,可以導(dǎo)致大鼠遠(yuǎn)期學(xué)習(xí)記憶功能損害。⑵7日齡大鼠急性暴露與2.3%七氟烷4小時候后,發(fā)生遠(yuǎn)期學(xué)習(xí)記憶功能損害可能與α7-nAChR在mRNA水
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