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1、我國(guó)的山羊生產(chǎn),存在著周轉(zhuǎn)慢、效率低、效益差問題,要改變這樣的現(xiàn)狀,最有力的手段就是提高山羊的繁殖力。世界絕大多數(shù)山羊品種為季節(jié)性發(fā)情、產(chǎn)仔率低下,而我國(guó)的濟(jì)寧青山羊卻具早熟多胎、四季發(fā)情等優(yōu)點(diǎn)。鑒于此,本研究以差異顯示PCR(DDRT-PCR)法和候選基因法兩種方法并行的方式,對(duì)可能影響山羊高繁殖力的EST和候選基因開展篩選工作,以在一定程度上揭示山羊高繁殖力的分子遺傳機(jī)理,為從遺傳上控制山羊的繁殖性狀提供理論依據(jù)。 本研究以
2、濟(jì)寧青山羊和遼寧絨山羊兩品種的下丘腦和卵巢兩個(gè)組織作為研究對(duì)象,進(jìn)行了差異顯示PCR(DDRT-PCR)研究,結(jié)果在1195條EST中獲得24條雜交驗(yàn)證為陽性的差異表達(dá)片段,克隆測(cè)序后用Blast軟件將其與GenBank中已知序列進(jìn)行了相似性比對(duì),并進(jìn)一步做功能推測(cè),發(fā)現(xiàn)了10條差異表達(dá)片段與三個(gè)功能基因相似,分別為YidC基因、GATA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子和CAT基因,14條差異表達(dá)片段沒有找到相似序列或者相似序列功能未知。分析結(jié)果表明:
3、 (1)GATA轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子在山羊的繁殖系統(tǒng)有著明顯的功能和作用,參與著山羊的性別決定和繁殖功能的調(diào)控。 (2)YidC基因可能與山羊繁殖細(xì)胞某些物質(zhì)的跨膜轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)。 本研究同時(shí)以濟(jì)寧青山羊、波爾山羊、遼寧絨山羊、內(nèi)蒙古絨山羊、文登奶山羊和北京本地山羊6個(gè)山羊品種為研究對(duì)象,采用PCR-RFLP和PCR-SSCP兩種方法分析鑒定了GDF9基因的1184bp處的堿基突變(C1184T)、BMP15基因核苷酸718處的堿
4、基突變(C718T)和1100處的堿基突變(G1100T)、MTNR1A基因的第2外顯子大部分序列和INHα基因的5'調(diào)控區(qū)及外顯子1序列。研究結(jié)果表明: (1)GDF9基因的編碼區(qū)1184bp處的堿基突變(C1184T)和BMP15基因的編碼區(qū)718處堿基突變(C718T)及編碼區(qū)110處的堿基突變(G1100T)與山羊的高繁殖力無顯著相關(guān)。 (2)MTNR1A基因的擴(kuò)增片段對(duì)于限制性內(nèi)切酶Mn1Ⅰ酶切位點(diǎn)與山羊繁殖的
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