促黃體素β亞基基因多態(tài)性及其與小尾寒羊高繁殖力關(guān)系的研究.pdf

1、該課題以促黃體素β亞基基因的多態(tài)性為研究?jī)?nèi)容,旨在探索該候選基因與小尾寒羊高繁殖力之間的關(guān)系,為中國(guó)開(kāi)展小尾寒羊高繁殖力的遺傳學(xué)基礎(chǔ)研究提供科學(xué)依據(jù).應(yīng)用PCR-SSCP技術(shù)對(duì)兩組樣本進(jìn)行促黃體素β亞基基因序列(1686bp)多態(tài)性分析:一組為243頭有產(chǎn)羔記錄的小尾寒羊的血樣;另一組為四個(gè)無(wú)產(chǎn)羔記錄的綿羊品種的血樣.得到如下結(jié)果:在5'區(qū)709bp長(zhǎng)的片段上,4個(gè)位點(diǎn)中有2個(gè)位點(diǎn)存在突變,即LHβ5'-2,LHp5'-4. LHβ5'

2、-2位點(diǎn)有5種基因型(AA、AB、BB、CC、AC),三種等位基因(A、B和c); LHβ5'-4位點(diǎn)有3種基因型(AA、AB、AC),也是三種等位基因.2個(gè)外顯子(exon2和exon3)中,外顯子2存在突變,具有兩種基因型(AA、AB),兩種等位基因(A、B).在所檢測(cè)的小尾寒羊個(gè)體中,外顯子1的22個(gè)堿基包括一段很短的非翻譯區(qū)和編碼部分信號(hào)肽的序列,這于所研究的繁殖性狀沒(méi)有意義,沒(méi)有進(jìn)一步做多態(tài)性分析.對(duì)5'區(qū)的2個(gè)突變序列和1個(gè)

3、外顯子的突變序列分別作克隆和測(cè)序分析,結(jié)果如下:在LHβ5'-2有A→G(-424),T→c(-271);LHp5'-4序列中有G→A(-6),C→(+53);外顯子2的序列中有G→C(+332).利用TFSEARCHver1.3軟件對(duì)促黃體素β亞基基因5'區(qū)序列的調(diào)控因子結(jié)合情況進(jìn)行預(yù)測(cè),結(jié)果表明5'調(diào)控區(qū)的堿基突變前和突變后,引起了所結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子的不同,尤其是落在LHβ5'-2區(qū)內(nèi)的A→G(-424),T→(-271))突變引起的調(diào)

4、控因子變化明顯.外顯子2的堿基突變使丙氨酸替代了甘氨酸,但沒(méi)有出現(xiàn)氨基酸二級(jí)結(jié)構(gòu)的變化.在有產(chǎn)羔記錄的小尾寒羊中,各變因與繁殖性狀關(guān)系的最小二乘分析結(jié)果表明:綿羊產(chǎn)羔的胎次對(duì)繁殖性能的影響都達(dá)到了極顯著水平;LHβ5'-2的不同基因型對(duì)繁殖性能的影響達(dá)到了極顯著水平.在無(wú)產(chǎn)羔記錄的四個(gè)品種綿羊中,通過(guò)卡方分析表明:LHβ5'-2和exon2位點(diǎn)的不同基因型在品種間都分別達(dá)到了差異顯著水平.該研究所發(fā)現(xiàn)的LHβ5'-2的多態(tài)性可能與繁殖性