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文檔簡介
1、目的:通過觀察麝香烏龍丸對大鼠佐劑性關(guān)節(jié)炎(Adjuvant Arthritis, AA)模型垂體組織形態(tài)及促腎上腺皮質(zhì)激素(adrenocorticotropic hormone, ACTH)、β-內(nèi)啡肽(β-endorphin,β-EP)表達(dá)的影響,探討麝香烏龍丸治療類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(Rheumatoid arthritis, RA)的鎮(zhèn)痛作用機(jī)制,為其臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)與理論依據(jù)。
方法:將60只雄性Wistar大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)
2、7d后,隨機(jī)抽取12只,作為正常組。除正常組外,其余48只大鼠均使用乙醚麻醉,于右后足跖注射完全弗氏佐劑(Freund’s complete adjuvant, FCA),建立AA大鼠模型,造模第15天按關(guān)節(jié)炎指數(shù)(arthritis index, AI)隨機(jī)分成模型組、麝香烏龍丸低劑量組、麝香烏龍丸中劑量組、麝香烏龍丸高劑量組,每組12只。分別給予麝香烏龍丸低、中、高劑量組麝香烏龍丸0.3 g·kg-1,0.6 g·kg-1,1.2
3、g·kg-1(生理鹽水混懸,分別相當(dāng)于成人用藥劑量的3,6,12倍),正常組與模型組給予灌胃等容量生理鹽水,每日1次,連續(xù)給藥2周。第15天將所有大鼠處死后打開腦腔,取出垂體,垂體組織形態(tài)觀察采用蘇木素—伊紅(HE)染色方法,在光鏡下觀察各組垂體組織形態(tài)的變化,ACTH、β-EP的表達(dá)變化采用免疫組化法進(jìn)行觀察,統(tǒng)計(jì)陽性細(xì)胞表達(dá)率。
結(jié)果:1、對大鼠一般情況的影響:正常組大鼠飲食正常,皮毛光亮,精神狀態(tài)佳。其余大鼠注射 FCA
4、后出現(xiàn)注射足腫脹并出現(xiàn)左后足及前足紅腫,活動減少,飲食飲水減少,毛發(fā)稀疏、無光澤,行走困難。給藥期間,麝香烏龍丸治療組大鼠較模型組一般情況較好,反應(yīng)靈敏,活動增多,足踝和足掌腫脹逐漸減輕,皮毛有光澤。2、對大鼠 AI的影響:與正常組相比造模各組大鼠 AI顯著升高(P<0.05)。治療后與模型組比較,麝香烏龍丸低、中、高各組AI均明顯下降(P<0.05),尤以麝香烏龍丸高劑量組下降明顯。3、對大鼠垂體組織形態(tài)的影響:光鏡下觀察各組HE染色
5、后切片發(fā)現(xiàn),與正常組相比,其余各組垂體組織形態(tài)均無明顯改變。4對垂體 ACTH表達(dá)的影響:采用免疫組化實(shí)驗(yàn)方法觀察各組大鼠垂體組織內(nèi) ACTH表達(dá)變化,結(jié)果各組 ACTH細(xì)胞陽性率分別為正常組40.23±3.43,模型組56.82±3.97,麝香烏龍丸低劑量組53.14±4.16,麝香烏龍丸中劑量組50.14±3.39,麝香烏龍丸高劑量組46.87±3.31。與正常組相比,其余4組 ACTH細(xì)胞陽性表達(dá)均明顯升高,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(
6、P<0.01)。麝香烏龍丸低劑量組與模型組ACTH陽性表達(dá)無顯著性差異(P>0.05)。麝香烏龍丸中劑量組與麝香烏龍丸高劑量組ACTH細(xì)胞陽性表達(dá)明顯低于模型組,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05或P<0.01),麝香烏龍丸低、中、高三組對垂體ACTH陽性細(xì)胞表達(dá)的影響有劑量相關(guān)性,其中以麝香烏龍丸高劑量組下調(diào) ACTH表達(dá)最為明顯。5、對垂體β-EP表達(dá)的影響:采用免疫組化實(shí)驗(yàn)方法觀察各組大鼠垂體組織內(nèi)β-EP表達(dá)變化,發(fā)現(xiàn)各組β-EP
7、細(xì)胞陽性率分別為正常組30.84±2.19,模型組39.72±2.66,麝香烏龍丸低劑量組43.55±3.59,麝香烏龍丸中劑量組46.69±3.62,麝香烏龍丸高劑量組49.47±3.17。相較于正常組,模型組與麝香烏龍丸低、中、高各組β-EP細(xì)胞陽性表達(dá)均明顯升高,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。麝香烏龍丸低、中、高劑量組β-EP陽性表達(dá)均明顯高于模型組,且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),麝香烏龍丸低、中、高三組對垂體β-
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