我國蜜蜂微孢子蟲種質(zhì)分布及侵染意蜂中腸的蛋白質(zhì)組分析.pdf

1、蜜蜂作為昆蟲模式生物，是自然界中的一種重要的授粉昆蟲。微孢子蟲病是由微孢子蟲所引起的危害成年蜜蜂健康的一種重要疾病。它不僅影響了蜜蜂的消化系統(tǒng)，降低了蜜蜂的抵抗力，而且導致蜂王繁殖能力下降，使群勢大幅下降。目前已知危害蜜蜂的微孢子蟲有兩種:一種是蜜蜂微孢子蟲(Nosema apis);另一種是東方蜜蜂微孢子蟲(Nosema cerana)。據(jù)目前國際上的報道發(fā)現(xiàn)，東方蜜蜂微孢子蟲（Nosema cerana）已成為西方蜜蜂群中微孢子蟲病

2、的主要病原，對西方蜜蜂造成了更大的損失。鑒于我國這方面的系統(tǒng)研究尚少，有必要對我國主要意大利蜜蜂養(yǎng)蜂地區(qū)微孢子蟲的種群分布進行進一步調(diào)查。此外，雖然關于微孢子蟲病的相關報道越來越多，但蜜蜂的微孢子蟲病致病機理及蜜蜂的免疫應激反應尚不是很清楚。為了明確蜜蜂的病原微孢子蟲種群分布以及微孢子蟲的致病機理，本研究通過采用多重PCR的方法對蜜蜂微孢子蟲在全國主要養(yǎng)蜂地區(qū)的種群分布情況進行了調(diào)查;并采用iTRAQ技術，對東方蜜蜂微孢子蟲（Nosem

3、acerana）侵染前后意蜂(Apis mellifera)中腸組織進行了差異蛋白質(zhì)組分析;結合受侵染蜜蜂蛋白質(zhì)組分析結果對東方蜜蜂微孢子蟲侵染意蜂的致病機理及蜜蜂的免疫反應進行了初步的探究。
　　本實驗所得到的主要結果如下:
　　1.對采集自全國16個養(yǎng)蜂地區(qū)的69份樣品進行了微孢子蟲種質(zhì)鑒定。鑒定結果發(fā)現(xiàn)，所有69份樣品均發(fā)現(xiàn)了東方蜜蜂微孢子蟲(Nosema cerana)，而僅在山東壽光的一份樣品中同時檢測到了東方蜜蜂

4、微孢子蟲(Nosema cerana)和蜜蜂微孢子蟲（Nosema apis）。初步明確了東方蜜蜂微孢子蟲在中國西方蜜蜂群中已成為主要的病原種，同時進一步驗證了前人所報道的同一個蜂場可以同時感染2個種微孢子蟲的現(xiàn)象。
　　2.選取濃度為2×108個/mL的東方蜜蜂微孢子蟲（Nosema cerana）對意蜂(Apis mellifera)進行人工侵染，采用iTRAQ技術對侵染后24h、48h、96h、144h的病蜂進行蛋白質(zhì)組研究