益氣活血方對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化家兔血液流變學(xué)和動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖的影響.pdf

1、本研究應(yīng)用高脂飼料喂養(yǎng)建立動(dòng)脈粥樣硬化家兔模型，以硝苯地平為對(duì)照，通過(guò)檢測(cè)家兔血液流變學(xué)主要指標(biāo)、腹主動(dòng)脈血小板源生長(zhǎng)因子B鏈和平滑肌α-肌動(dòng)蛋白的表達(dá)，旨在探討益氣活血方芪丹煎防治動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制，為進(jìn)一步擴(kuò)大益氣活血方芪丹煎的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 研究方法： 1.動(dòng)物分組及處理：將24只4月齡健康雄性新西蘭白兔，(體重2.4～2.9kg)，隨機(jī)均分為四組，即正常對(duì)照組、模型組、芪丹煎實(shí)驗(yàn)組和硝苯地平對(duì)照組。模型組

2、每天喂飼高脂顆粒飼料；芪丹煎實(shí)驗(yàn)組每兔每天喂飼按100g飼料含生藥60g的量制成的高脂顆粒飼料；硝苯地平對(duì)照組每天喂飼按每兔每日40mg硝苯地平的量制成的高脂顆粒飼料；正常對(duì)照組每天喂飼普通顆粒飼料。每組每天進(jìn)食總量相等，限制為100g，動(dòng)物分籠飼養(yǎng)，自由飲水，實(shí)驗(yàn)全程12周。12周后，各組家兔耳緣靜脈采血，用于檢測(cè)血小板粘附性和聚集性、血液流變學(xué)主要指標(biāo)；麻醉后開(kāi)胸取活體胸主動(dòng)脈組織(大小約1×1×0.5mm)，于4％戊二醛固定，用于

3、透射電鏡檢查超微結(jié)構(gòu)的變化；放血處死家兔，取腹主動(dòng)脈置于10％中性甲醛固定液，用于HE染色和血小板源生長(zhǎng)因子B鏈、平滑肌α-肌動(dòng)蛋白的免疫組化檢測(cè)。 2.觀察指標(biāo)：(1)血小板粘附性和聚集性的測(cè)定；(2)血液流變學(xué)主要指標(biāo)的測(cè)定；(3)HE染色病理觀察；(4)透射電鏡主動(dòng)脈觀察；(5)血小板源生長(zhǎng)因子B鏈和平滑肌α-肌動(dòng)蛋白免疫組化圖象分析。 研究結(jié)果： 1.成功建立動(dòng)脈粥樣硬化模型。 2.HE染色病理觀

4、察：正常對(duì)照組可見(jiàn)主動(dòng)脈內(nèi)膜表面光滑，中層平滑肌細(xì)胞數(shù)量不多。模型組可見(jiàn)主動(dòng)脈內(nèi)膜明顯增厚，管腔內(nèi)有動(dòng)脈粥樣斑塊形成，中層平滑肌細(xì)胞數(shù)量明顯增多。芪丹煎實(shí)驗(yàn)組內(nèi)膜增厚不明顯，管腔內(nèi)有少量動(dòng)脈粥樣斑塊形成，中層平滑肌細(xì)胞數(shù)量無(wú)明顯增多。硝苯地平對(duì)照組可見(jiàn)內(nèi)膜增厚不明顯，管腔內(nèi)有動(dòng)脈粥樣斑塊形成，中層平滑肌細(xì)胞數(shù)量增多。 3.透射電鏡主動(dòng)脈觀察：正常對(duì)照組家兔主動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)正常。模型組家兔主動(dòng)脈內(nèi)膜破壞，結(jié)構(gòu)紊亂，內(nèi)膜和中膜之間有大

5、量泡沫細(xì)胞，中膜結(jié)締組織大量增生，平滑肌細(xì)胞增生且穿過(guò)內(nèi)膜組織向管腔內(nèi)生長(zhǎng)。芪丹煎實(shí)驗(yàn)組主動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)的病理變化明顯減輕，內(nèi)膜基本平整，內(nèi)膜和中膜之間有結(jié)締組織增生，未見(jiàn)泡沫細(xì)胞，中膜結(jié)締組織增生不顯著。硝苯地平對(duì)照組主動(dòng)脈超微結(jié)構(gòu)有輕度異常。 4.血小板粘附性和聚集性的變化：與正常對(duì)照組比較，模型組、芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組血小板粘附率和聚集率均明顯升高(P＜0.01)。與模型組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組血小板粘附

6、率和聚集率明顯減少(P＜0.01)。與硝苯地平對(duì)照組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組血小板聚集率明顯降低(P＜0.05)，血小板粘附率有降低趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。 5.血液流變學(xué)主要指標(biāo)的變化：與正常對(duì)照組比較，模型組全血黏度(包括低切、高切)、血漿黏度及紅細(xì)胞壓積均明顯升高(P＜0.01，P＜0.05)。與模型組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組全血黏度(包括低切、高切)、血漿黏度及紅細(xì)胞壓積均明顯降低(P＜0.01，P＜0.05)。

7、 6.各組家兔腹主動(dòng)脈血小板源生長(zhǎng)因子B鏈表達(dá)的變化：與正常對(duì)照組比較，模型組、芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組腹主動(dòng)脈的血小板源生長(zhǎng)因子B鏈表達(dá)量明顯升高(P＜0.01)。與模型組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組的血小板源生長(zhǎng)因子B鏈表達(dá)量明顯降低(P＜0.01)。與硝苯地平對(duì)照組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組的血小板源生長(zhǎng)因子B鏈表達(dá)量明顯降低(P＜0.01)。 7.各組家兔腹主動(dòng)脈平滑肌α-肌動(dòng)蛋白表達(dá)的變化：與正常對(duì)照組比較，模型組

8、、芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組α-肌動(dòng)蛋白的表達(dá)量明顯降低(P＜0.01)。與模型組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組、硝苯地平對(duì)照組α-肌動(dòng)蛋白的表達(dá)顯著增強(qiáng)(P＜0.01)。與硝苯地平對(duì)照組比較，芪丹煎實(shí)驗(yàn)組的α-肌動(dòng)蛋白表達(dá)量明顯增強(qiáng)(P＜0.01)。 研究結(jié)論：本研究結(jié)果顯示，益氣活血方芪丹煎對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化有良好的防治作用，推測(cè)其作用機(jī)制包括以下幾個(gè)方面：(1)抑制血小板粘附聚集，降低血液粘稠度，改善血液流變性；(2)抑制主動(dòng)脈血小板源