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1、目的:運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)(FQ-PCR)快速檢測(cè)法檢測(cè)耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)核酸,從而建立下呼吸道標(biāo)本MRSA的快速檢測(cè)方法。
方法:(1)檢測(cè)方法建立及菌株研究:收集臨床分離的75株金黃色葡萄球菌菌株,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)法檢測(cè)標(biāo)本Nuc及MecA基因,并以分離培養(yǎng)+頭孢西丁紙片擴(kuò)散法為標(biāo)準(zhǔn),判斷實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)法與常規(guī)方法的一致性。(2)下呼吸道標(biāo)本研究:收集110份下呼吸道標(biāo)本
2、(合格痰液標(biāo)本70份,經(jīng)氣道吸引下呼吸道分泌物40份),經(jīng)過(guò)標(biāo)本預(yù)處理后,運(yùn)用實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)法檢測(cè),以分離培養(yǎng)+頭孢西丁紙片擴(kuò)散法為標(biāo)準(zhǔn),判斷實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)法對(duì)下呼吸道標(biāo)本檢測(cè)的敏感性、特異性。
結(jié)果:(1)以分離培養(yǎng)+頭孢西丁紙片擴(kuò)散法為標(biāo)準(zhǔn),實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)法檢測(cè)金黃色葡萄球菌菌株中MRSA的敏感度、特異度均為100%。(2)實(shí)時(shí)熒光定量PCR快速檢測(cè)法檢測(cè)下呼吸道標(biāo)本中MRSA的敏感度為10
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