軸突起始段可塑性在MCD大鼠癲癇易感性中的作用研究.pdf

1、目的：建立卡莫斯汀(BCNU)誘導(dǎo)的皮質(zhì)發(fā)育畸形(malformationof cortical development, MCD)大鼠模型，觀察MCD大鼠模型對(duì)氯化鋰-匹羅卡品(LiCl-PILO)致癇敏感性，研究致癇后皮質(zhì)神經(jīng)元軸突起始段(axon initial segment，AIS)的可塑性變化規(guī)律，探討AIS的可塑性變化在MCD大鼠癲癇易感性中的作用。
　　方法：
　　1.在孕鼠懷孕17天(E17d)時(shí)腹腔注射卡

2、莫斯汀(BCNU)，懷孕21天時(shí)生產(chǎn)仔鼠為MCD大鼠模型，Map1b免疫組化染色，驗(yàn)證MCD造模是否成功，取6-8周齡MCD大鼠和正常發(fā)育大鼠，腹腔注射LiCl-PILO誘導(dǎo)癲癇持續(xù)狀態(tài)(status epileptics，SE)，建立MCD癲癇大鼠模型;
　　2.記錄和比較急性SE誘導(dǎo)成功率和死亡率，記錄MCD和普通正常發(fā)育大鼠癲癇模型急性期和慢性期腦電圖(EEG);
　　3.免疫熒光研究AIS區(qū)可塑性:a.分組:MCD+

3、SE組、MCD組、SE組和正常對(duì)照組;b.以SE后24小時(shí)、30天和60天為時(shí)間點(diǎn)取大鼠大腦組織制備冰凍切片，采用免疫熒光方法標(biāo)記AIS區(qū)特異性蛋白ankyrinG，觀察并測(cè)量各四組大鼠皮質(zhì)感覺運(yùn)動(dòng)區(qū)神經(jīng)元AIS區(qū)長(zhǎng)度變化。
　　結(jié)果：
　　1.Map1b免疫組化染色提示成功建立了MCD模型。
　　2.MCD大鼠致癇成功率和總死亡率與正常發(fā)育大鼠無明顯差異(P＞0.05)，但致癇成功大鼠死亡率較高(P＜0.05);

4、r>　　3.MCD大鼠和正常發(fā)育大鼠致癇急性期EEG形態(tài)相似，慢性期EEG可見自發(fā)放電，且自發(fā)放電幅度、持續(xù)時(shí)間、平均每小時(shí)自發(fā)放電次數(shù)均較正常發(fā)育大鼠增高(P＜0.001);
　　4.皮質(zhì)感覺運(yùn)動(dòng)區(qū)神經(jīng)元AIS區(qū)長(zhǎng)度: a.SE后24小時(shí)，MCD+SE組較SE組、MCD組顯著縮短(P＜0.001)，SE組較正常對(duì)照組亦明顯縮短(P＜0.001)，而MCD組與正常對(duì)照組相比無顯著差異(P＞0.05); b.SE后30天和60天，M