養(yǎng)殖刺參（Apostichopus japonicus）“腐皮綜合征”病原學(xué)及其感染源的研究.pdf

1、近年來，山東和遼寧兩省大力發(fā)展刺參養(yǎng)殖業(yè)，使其一躍成為中國(guó)北方沿海水產(chǎn)養(yǎng)殖的重要新興產(chǎn)業(yè)，取得了顯著的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。2004年，兩省的刺參養(yǎng)殖面積達(dá)到4萬hm<'2>以上，總產(chǎn)值超過100億元，成為當(dāng)前中國(guó)海水養(yǎng)殖業(yè)中產(chǎn)值最大的養(yǎng)殖品種之一。然而，由于養(yǎng)殖的過速發(fā)展和不規(guī)范運(yùn)作造成了病害問題日趨突出，出現(xiàn)了多種明顯病癥和大規(guī)模死亡現(xiàn)象，其中，越冬保苗期和養(yǎng)成期出現(xiàn)的“腐皮綜合征”是目前刺參養(yǎng)殖中危害最為嚴(yán)重的疾病。給廣大刺參養(yǎng)殖業(yè)

2、者造成了慘重的經(jīng)濟(jì)損失，也嚴(yán)重制約了該產(chǎn)業(yè)的持續(xù)穩(wěn)定發(fā)展。為保證刺參養(yǎng)殖業(yè)健康發(fā)展，積極開展“腐皮綜合征”流行病學(xué)及病原學(xué)研究是對(duì)疾病進(jìn)行綜合防治必不可少的基礎(chǔ)性工作。 2003～2005年期間，對(duì)山東、遼寧兩省養(yǎng)殖刺參“腐皮綜合征”進(jìn)行了全面、系統(tǒng)的流行病學(xué)調(diào)查。結(jié)果表明：“腐皮綜合征”是當(dāng)前養(yǎng)殖刺參最常見、危害最為嚴(yán)重的疾病，該病發(fā)生率達(dá)80％，遍及各養(yǎng)殖區(qū)域；傳染性強(qiáng)，許多養(yǎng)殖單位的死亡率高達(dá)90％以上。越冬保苗期幼參和養(yǎng)

3、成期海參均可被感染發(fā)病，每年的12～3月份養(yǎng)殖水體溫度較低時(shí)(8℃以下)是發(fā)病高峰，溫度較高的夏秋季節(jié)也有發(fā)生。病參的主要癥狀從初期感染的口部腫脹、吐腸、收縮僵直，到后期感染的體表大面積潰瘍，最后導(dǎo)致海參死亡。病原排查發(fā)現(xiàn)該病主要是由細(xì)菌引起的，并對(duì)其發(fā)病特點(diǎn)和發(fā)病原因進(jìn)行了探討。 本文首先對(duì)越冬保苗期刺參“腐皮綜合征”進(jìn)行了初步的病原學(xué)分析，從其中三家育苗場(chǎng)患病個(gè)體病灶部位分離到了一種菌落形態(tài)一致的優(yōu)勢(shì)菌FP-1，從另外兩家育

4、苗場(chǎng)患病個(gè)體潰瘍部位分離得到另一種優(yōu)勢(shì)細(xì)菌FP-2，經(jīng)人工感染實(shí)驗(yàn)證明對(duì)兩種優(yōu)勢(shì)菌FP-1和IFP-2都對(duì)健康幼參具有較強(qiáng)的致病性，且感染病參的癥狀與自然發(fā)病海參的癥狀相同，通過形態(tài)學(xué)、生理生化和16S rDNA分子生物學(xué)方法對(duì)該菌進(jìn)行的分類鑒定表明，F(xiàn)P-1是一種假交替單胞菌(Pseudoalteromonasnigrifaciens)，F(xiàn)P-2是一種弧菌屬細(xì)菌(Vibrio sp．)。 對(duì)由假交替單胞菌(Pseudoalte

5、romonas nigrfaciens)導(dǎo)致“腐皮綜合征”的三家育苗場(chǎng)的整個(gè)養(yǎng)殖系統(tǒng)的水源、養(yǎng)殖池水、池底污物、餌料等進(jìn)行的調(diào)查發(fā)現(xiàn)：水源中細(xì)菌含量不高，在0.8x10<'2>～1.2x10<'2>cells／mL之間，其特征與病灶處優(yōu)勢(shì)菌不同；而餌料中細(xì)菌含量最高可達(dá)3.2x10<'6> cells／mL，餌料、池水和池底污物的優(yōu)勢(shì)菌與病灶處優(yōu)勢(shì)菌基本一致，說明餌料可能是病原菌的主要來源。 對(duì)養(yǎng)成期刺參“腐皮綜合征”也進(jìn)行了詳

6、細(xì)的病原學(xué)分析。2004年12月我們對(duì)冬季刺參養(yǎng)成期“腐皮綜合征”進(jìn)行了詳細(xì)的病原學(xué)研究，從山東膠南、蓬萊的兩家養(yǎng)殖場(chǎng)的冬季養(yǎng)成期刺參病灶部位均分離到兩種優(yōu)勢(shì)細(xì)菌B1和B2，人工感染實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)該兩種菌都對(duì)健康刺參具有較強(qiáng)的致病性，感染病參的癥狀與自然發(fā)病海參的癥狀相同。采用常規(guī)生理生化方法和16 S rDNA分子生物學(xué)鑒定法對(duì)該菌進(jìn)行了分類鑒定，鑒定結(jié)果表明Bl為燦爛弧菌(V．splendidus biovarⅡ)，B2為弧菌屬細(xì)菌(Vi

7、brio sp)。2005年9月對(duì)長(zhǎng)島、龍口桑島以及膠南等地的夏季養(yǎng)成期刺參“腐皮綜合征”進(jìn)行了病原學(xué)研究，從所有病參的病灶部位都分離到了一種優(yōu)勢(shì)度很高的致病菌A1，經(jīng)形態(tài)培養(yǎng)特性、生理生化實(shí)驗(yàn)、人工感染試驗(yàn)將該病原菌鑒定為嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophlia)。 為查找疾病的感染源，2005年1月我們對(duì)由弧菌導(dǎo)致“腐皮綜合征”發(fā)生的蓬萊這家養(yǎng)殖場(chǎng)養(yǎng)殖系統(tǒng)的水源(近岸海水)、養(yǎng)殖池水、底泥等進(jìn)行的調(diào)查分析表明，

8、養(yǎng)殖場(chǎng)周圍近岸海水水質(zhì)一般，養(yǎng)殖池內(nèi)水質(zhì)較差，而且發(fā)病養(yǎng)殖池水和底泥中的細(xì)菌含量都非常高，經(jīng)生理生化比較發(fā)現(xiàn)，養(yǎng)殖池水和底泥中分離到的優(yōu)勢(shì)菌與刺參病灶處分離的優(yōu)勢(shì)菌基本一致，而水源中無優(yōu)勢(shì)菌，這說明底泥可能是該養(yǎng)殖場(chǎng)病原菌的來源。 研究結(jié)果表明，假交替單胞菌(Pseudoalteromonas nigrifaciens)，燦爛弧菌(V.splendidus biovar Ⅱ)，嗜水氣單胞菌(Aeromonas hydrophli