白藜蘆醇苷對MODS大鼠IL-6-IL-4及Ia抗原表達(dá)的影響.pdf

1、第一部分 MODS大鼠模型的建立及其發(fā)病機制 目的：復(fù)制“二次打擊"MODS動物模型，探討MODS大鼠血清IL-6、IL-4和肺泡巨噬細(xì)胞表面Ia抗原的變化規(guī)律及其之間的關(guān)系，進(jìn)一步闡明MODS發(fā)病過程中促炎／抗炎平衡和免疫狀態(tài)的變化。 方法：采用腸缺血一再灌注損傷后12小時腹腔注射小劑量酵母多糖的方法，復(fù)制‘‘二次打擊"MODS動物模型。將SD大鼠39只隨機分為假手術(shù)對照組(15只)、MODS模型組(24只)，

2、每組再根據(jù)傷后處死動物的不同時間分為1h、3h、6h三個亞組。假手術(shù)對照組僅給予開腹手術(shù)，不進(jìn)行二次打擊，用等量生理鹽水代替酵母多糖腹腔注射。觀察各組重要臟器功能指標(biāo)和病理學(xué)形態(tài)變化，并分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(EILSA)和流式細(xì)胞技術(shù)對大鼠血清IL-6、IL-4水平和肺泡巨噬細(xì)胞表面Ia抗原的表達(dá)進(jìn)行檢測。 結(jié)果：與假手術(shù)對照組比較，模型組大鼠6小時后各重要臟器均出現(xiàn)明顯病理學(xué)改變，各臟器功能指標(biāo)呈逐漸升高趨勢；CK-MB、A

3、LT、Cr傷后3小時即可見明顯增高(P<0．05)，而肺W／D于傷后6小時也出現(xiàn)顯著性差異(P<0．05)。隨傷后時間的延長，模型組大鼠血清IL-6、IL-4水平逐漸增高，肺泡巨噬細(xì)胞Ia抗原表達(dá)逐漸降低；與對照組相比，模型組大鼠早期(1小時和3小時)血清IL-6水平已明顯增高，IL-6／IL-4比值增高，但I(xiàn)L-4水平和Ia抗原表達(dá)無顯著性差異，而晚期IL-6、IL-4水平均明顯增高，IL-6／IL-4比值降低，Ia抗原表達(dá)減少，且I

4、a抗原表達(dá)減少與IL-6／IL-4比值之間存在較強的正相關(guān)關(guān)系。 結(jié)論：采用腸缺血一再灌注損傷后腹腔注射小劑量酵母多糖的方法能較好地模擬MODS的致傷因素和發(fā)病過程，對大鼠多個重要臟器造成明顯損害，形成MODS。此方法操作簡單、易行、結(jié)果穩(wěn)定。MODS時，血清促炎細(xì)胞因子(IL-6)和抗炎細(xì)胞因子(IL-4)水平均顯著增高，早期以促炎反應(yīng)為主，晚期則以抗炎反應(yīng)占優(yōu)勢，二者的失衡導(dǎo)致了MODS的發(fā)生發(fā)展。免疫抑制發(fā)生較晚，此時以抗

5、炎反應(yīng)占優(yōu)勢，IL-6／IL-4比值與免疫抑制的程度密切相關(guān)。 第二部分白藜蘆醇苷對MODS大鼠的免疫保護(hù)機制 目的：觀察PD對MODS發(fā)病過程中血清IL-6、IL-4及肺泡巨噬細(xì)胞Ia抗原表達(dá)的影響，從分子生物學(xué)水平探討PD發(fā)揮多臟器保護(hù)作用的機制，為尋找防治MODS的藥物提供有力的證據(jù)。 方法：SD大鼠48只隨機分為MODS模型組(24只)和PD治療組(24只)，根據(jù)第一部分方法建立MODS動物模型，PD治療

6、組于腹腔注射酵母多糖后立即尾靜脈注射0．5％PD溶液2ml／kg。觀察各組重要臟器功能指標(biāo)和病理學(xué)形態(tài)變化，并分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(EILSA)和流式細(xì)胞技術(shù)對大鼠血清IL-6、IL-4水平和肺泡巨噬細(xì)胞表面Ia抗原的表達(dá)進(jìn)行檢測。 結(jié)果：二次打擊6小時后，PD治療組各重要臟器病理改變較模型組明顯減輕。經(jīng)過PD體內(nèi)干預(yù)，觀察早期(1小時和3小時)，血清ALT、Cr、CK—MB水平、肺W／D等臟器功能指標(biāo)較MODS模型組均出現(xiàn)不

7、同程度的降低，但無顯著性差異；晚期(6小時)則可見明顯降低(P<0．05)。早期(1小時和3小時)血清IL-6、IL-4、IL-6／IL-4水平及肺泡巨噬細(xì)胞Ia抗原未見明顯變化，晚期(6小時)血清IL-6和IL-4水平較MODS模型組明顯降低(P<0．05)，IL-6／IL-4比值增高(P<0．05)，Ia抗原表達(dá)增加(P