FHIT、RUNX3甲基化與肺癌診斷相關(guān)性研究.pdf

1、目的:本研究收集50例NSCLC組織及50例對(duì)應(yīng)相距肺癌組織5cm以上的正常肺組織，采用MSP（甲基化特異性PCR）擴(kuò)增目標(biāo)基因片段，然后進(jìn)行3％瓊脂糖凝膠電泳，得出標(biāo)本中的FHIT和RUNX3基因啟動(dòng)子甲基化情況，根據(jù)100例標(biāo)本中兩種基因甲基化情況，分析兩種基因甲基化與非小細(xì)胞型肺癌的臨床病理資料之間的關(guān)系，為肺癌早期診斷提供相關(guān)研究資料、證據(jù)。
　　方法:
　　1.收集50例非小細(xì)胞型肺癌患者術(shù)后肺癌組織及50例對(duì)應(yīng)的

2、正常肺組織。用低溫冰箱保存標(biāo)本;
　　2.基因組DNA抽提試劑盒提取收集到的100例標(biāo)本DNA;
　　3.采用MSP（甲基化特異性PCR）擴(kuò)增組織DNA;
　　4.擴(kuò)增后的DNA進(jìn)行3％瓊脂糖凝膠電泳;
　　5.應(yīng)用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
　　結(jié)果:
　　1、FHIT基因MSP結(jié)果
　　采用DNA抽提試劑盒提取50對(duì)肺癌組織及正常肺組織DNA，再進(jìn)行MSP和電泳。FHIT甲基化陽性率

3、在肺癌組織及正常組織的結(jié)果分別為38％(19/50)、4％(2/50)，并且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000)。按吸煙指數(shù)分吸煙組及未吸煙組，兩組甲基化情況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，吸煙與肺癌FHIT基因甲基化無關(guān)。性別、年齡、臨床分期、肺癌病理分型和不同病理分級(jí)與FHIT基因甲基化情況無關(guān)，分組之間陽性率差異也沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　2、RUNX3基因的MSP結(jié)果
　　50例肺癌組織及50例距腫瘤5

4、cm以上的正常肺組織中的RUNX3基因甲基化陽性率分別24％(12/50)、2％(1/50)，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p=0.000)。吸煙組肺癌組織和非吸煙肺癌組織組RUNX3基因甲基化差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。肺癌組中腺癌的RUNX3基因甲基化陽性率要高于鱗癌，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。性別、年齡、臨床分期和病理分化方面RUNX3基因甲基化差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　3、FHIT基因和RUNX3基因

5、的聯(lián)合分析結(jié)果
　　本實(shí)驗(yàn)研究兩種基因在肺癌患者中甲基化狀態(tài)，發(fā)現(xiàn)兩個(gè)基因之間在肺癌標(biāo)本中的甲基化狀態(tài)并沒有相關(guān)性。肺癌組織FHIT和RUNX3基因甲基化聯(lián)合檢驗(yàn)陽性率要高于其中一種基因檢測(cè)的陽性率。吸煙組中的FHIT基因和RUNX3基因甲基化聯(lián)合檢測(cè)陽性率要高于其中一種基因甲基化，并且吸煙組與非吸煙組相比，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1、肺癌患者的肺癌組織中FHIT基因的陽性率顯著高于正常肺

6、組織的陽性率，并且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明FHIT基因甲基化與肺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。在不同的肺癌患者的性別、年齡、臨床分期、病理分類和病理分化方面，F(xiàn)HIT基因的甲基化陽性率差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2、肺癌組織中RUNX3基因的陽性率為24％，而正常肺組織只有一例甲基化陽性，前者陽性率顯著高于后者陽性率，并且具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，表明RUNX3基因甲基化與肺癌的發(fā)生發(fā)展有關(guān)。肺腺癌組織的RUNX3基因甲基化程度高于肺鱗癌，但是該基因的甲基化