VEGF-1190G-A多態(tài)性與2型糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)系.pdf

1、研究背景與目的:糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常見及最嚴(yán)重的微血管并發(fā)癥之一,已成為世界四種主要致盲性眼病之一,其基本的病理改變?yōu)槊?xì)血管周細(xì)胞的消失,血-視網(wǎng)膜屏障受損和新生血管形成。DR的發(fā)病機(jī)制目前尚未完全闡明。一些研究表明其發(fā)展是多種因素和多種途徑共同作用的結(jié)果。DR的發(fā)生和發(fā)展與糖尿病的病程及血糖控制水平有緊密聯(lián)系,大部分糖尿病患者,尤其血糖水平控制欠佳、病程較長(zhǎng)的患者易發(fā)生DR,

2、但其發(fā)生和發(fā)展與糖尿病的病程及血糖控制水平并不是完全呈正相關(guān)關(guān)系。有研究顯示約28.8％的糖尿病患者早期即可發(fā)生視網(wǎng)膜病變,但仍有大約22.2％的糖尿病患者,不管其血糖水平控制如何,都未發(fā)生視網(wǎng)膜病變。這表明遺傳因素可能是糖尿病視網(wǎng)膜病變的始動(dòng)因素。近年來隨著分子生物學(xué)的快速發(fā)展,許多國(guó)內(nèi)外學(xué)者已通過多項(xiàng)研究篩選出可能影響DR的候選基因,并著手從基因多態(tài)性及基因調(diào)控方面來分析遺傳因素對(duì)DR的影響,VEGF基因就是眾多候選基因中的一個(gè)。盡

3、管這些研究已經(jīng)取得了一定的進(jìn)展,但目前尚未有統(tǒng)一的結(jié)論。
　　 血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)又稱血管通透因子(vascular permeability factor,VPF),它可以與血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性結(jié)合,從而發(fā)揮生物學(xué)作用,使血管通透性增強(qiáng),并能促進(jìn)新生血管的形成。它在DR的發(fā)生和發(fā)展中起著及其重要的作用。VEGF基因單核苷酸多態(tài)性(single nuc

4、leotide polymorphism,SNP)可能影響基因的轉(zhuǎn)錄和翻譯,因而與多種疾病的發(fā)生發(fā)展有密切關(guān)系。關(guān)于VEGF基因單核苷酸多態(tài)性與DR的關(guān)系的研究已經(jīng)有很多,但其結(jié)果并不完全相同,還存在很大的分歧,因此有必要對(duì)此繼續(xù)進(jìn)行深入的研究。VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)、5'-及3'-非翻譯區(qū)存在多個(gè)多態(tài)性位點(diǎn),-1190G/A位點(diǎn)位于VEGF基因的啟動(dòng)子區(qū),很可能會(huì)影響基因的表達(dá)水平,從而導(dǎo)致DR的發(fā)生。因此本文將采用聚合酶鏈-連接酶檢測(cè)

5、反應(yīng)(PCR-LDR)對(duì)VEGF基因啟動(dòng)子區(qū)-1190G/A這一位點(diǎn)的多態(tài)性與中國(guó)石家莊地區(qū)漢族人群2型糖尿病視網(wǎng)膜病變的關(guān)系進(jìn)行研究。
　　 方法:本研究采用病例一對(duì)照的研究方法,共隨機(jī)選取324例2型糖尿病患者作為研究對(duì)象,其中非增殖期視網(wǎng)膜病變患者(NPDR)124例,增殖期視網(wǎng)膜病變患者(PDR)56例,僅有糖尿病而無視網(wǎng)膜病變的患者144例作為對(duì)照組(Control組)。所有研究對(duì)象均為中國(guó)石家莊地區(qū)漢族人,各研究對(duì)象

6、之間無親緣關(guān)系。采取所有研究對(duì)象的外周靜脈血5ml,用蛋白酶K消化一飽和氯化鈉鹽析法提取外周血白細(xì)胞DNA,并經(jīng)PCR-LDR檢測(cè)分析VEGF基因-1190G/A位點(diǎn)的基因型及等位基因分布頻率。數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS13.0版軟件包(SPSS Company,Chicago,Illionis,USA)進(jìn)行,P＜α=0.05認(rèn)為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。對(duì)計(jì)量資料進(jìn)行正態(tài)性檢驗(yàn),符合正態(tài)性分布的資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示,非正態(tài)性分布資料以中位數(shù)(四分

7、位數(shù)間距)表示。采用Hardy-Weinberg平衡分析法檢驗(yàn)各組基因型頻率的群體代表性。計(jì)量資料采用t檢驗(yàn);計(jì)數(shù)資料采用行×列表x2檢驗(yàn)。以非條件Logistic回歸分析計(jì)算相對(duì)風(fēng)險(xiǎn)度的比值比(odds ratio,OR)及95％可信區(qū)間(confidence interval,CI)。
　　 結(jié)果:
　　 1 NPDR組的收縮壓與舒張壓比Control組增高(P＜0.05);PDR組的空腹血糖、收縮壓、舒張壓及糖尿病

8、病程比Control組均有所增高(P＜0.05)。PDR組空腹血糖、糖尿病病程經(jīng)其余因素校正的OR95％CI分別為:2.306(1.150-4.625)、2.221(1.439-3.427)。
　　 2 Control組、NPDR組、PDR組的VEGF基因-1190G/A位點(diǎn)均存在AA、AG、GG三種基因型,且其基因型頻率分布經(jīng)Hardy-Weinberg平衡分析符合群體基因遺傳平衡(P＞0.05)。
　　 3三組等位基

9、因及基因型頻率的比較結(jié)果:NPDR組與Control組相比,等位基因頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=8.213,P=0.004＜0.05),兩組相比G等位基因的OR95％CI=1.834(1.207-2.785)。PDR組與Control組相比,等位基因頻率分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.145,P=0.704＞0.05),兩組相比G等位基因的OR95％CI=1.101(0.671-1.086)。NPDR組與Control組相比,基因型

10、頻率分布差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=7.786,P=0.020＜0.05),與AA+AG基因型相比,經(jīng)空腹血糖、收縮壓、舒張壓及糖尿病病程校正的GG基因型OR95％CI=1.950(1.155-3.293)。PDR.組與Control組相比,基因型頻率分布差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(x2=0.134,P=0.935＞0.05),與AA+AG基因型相比,經(jīng)空腹血糖、收縮壓、舒張壓及糖尿病病程校正的GG基因型OR95％CI=1.225(0.615-2.4