EPO和TCF7L2基因多態(tài)性與糖尿病視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性研究.pdf

1、研究背景：
　　糖尿病是由于人體內(nèi)胰島素缺乏或相對缺乏所致的一種慢性內(nèi)分泌代謝性疾病，患病人數(shù)逐年增加，到2030年世界范圍內(nèi)預(yù)計達(dá)到4.38億，40％的糖尿病患者會進(jìn)展為糖尿病視網(wǎng)膜病變(diabetic retinopathy，DR)。DR是糖尿病患者最常見的微血管并發(fā)癥之一，是成年人最常見的致盲性眼病。大量研究顯示多種因素通過多種途徑參與DR的發(fā)病過程，其中，遺傳因素在DR發(fā)病中起到重要作用。已發(fā)現(xiàn)促紅細(xì)胞生成素(eryth

2、ropoietin，EPO)和轉(zhuǎn)錄因子7類似物2（trans cription factor7like2，TCF7L2）基因單核苷酸多態(tài)性(single nucleotide polymorphism，SNP)與高加索人群DR發(fā)病有明顯的相關(guān)性。EPO是一種促進(jìn)紅細(xì)胞生成的糖蛋白，在DR發(fā)病過程中發(fā)揮雙重的作用:在DR早期，EPO呈高表達(dá)，保護(hù)視神經(jīng)，防止視網(wǎng)膜細(xì)胞的死亡，保護(hù)血視網(wǎng)膜屏障;DR晚期，EPO增強(qiáng)血管內(nèi)皮生長因子(vasc

3、ular endothelial growth factor,VEGF)的作用，促進(jìn)視網(wǎng)膜新生血管形成，形成增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(proliferative diabetic retinopathy,PDR)。TCF7L2是一種高度變異的轉(zhuǎn)錄因予，在調(diào)控胰島β細(xì)胞分泌胰島素、胰島素抵抗、維持血糖穩(wěn)態(tài)和Wnt信號途徑中發(fā)揮重要作用。研究證實胰島素抵抗的患者比胰島素敏感的患者更易發(fā)生DR。Wnt信號通路在調(diào)控增殖性視網(wǎng)膜病變的病理性血管形

4、成過程中發(fā)揮重要作用。木研究針對EPO和TCF7L2基因多態(tài)性與2型糖尿病(type2 diabetes mellitus，T2DM)患者的DR發(fā)病的相關(guān)性做了一些工作。
　　研究目的：
　　觀察EPO基因多態(tài)性（rs1617640，rs507392和rs551238）和TCF7L2基因多態(tài)性(rsl1196205)與T2DM患者的DR疾病易感性的相關(guān)性，探討基因多態(tài)性在T2DM患者的DR發(fā)病過程中的作用。
　　研究方

5、法：
　　本研究為病例對照研究，包含792例T2DM患者，其中病例組設(shè)為DR患者，共448例，其中PDR患者220例，非增殖性糖尿病視網(wǎng)膜病變(non-proliferativediabeticretinopathy,NPDR)患者228例，對照組設(shè)為無視網(wǎng)膜病變(diabeteswithnoretinopathy,DNR)T2DM患者，共344例。抽提所有T2DM患者基因組DNA，采用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)-連接酶檢測反應(yīng)(polyme

6、rasechainreaction-ligasedetectionreaction，PCR-LDR)技術(shù)，對EPO基因多態(tài)性(rs1617640，rs507392和rs551238)和TCF7L2基因多態(tài)性(rsl1196205)進(jìn)行分型。應(yīng)用t檢驗和x2檢驗對各組患者的基本資料包括性別，年齡，病程，血脂，血糖，糖化血紅蛋白水平進(jìn)行分析。計算各位點等位基因及基因型頻率，并進(jìn)行Hardy-Weinberg平衡檢測;應(yīng)用x2檢驗，比較各組等

7、位基因頻率分布差異，采用dominant、recessive和additive模型比較各組基因型頻率分布差異。應(yīng)用SHEsis和Haploview軟件對EPO基因3個位點分別進(jìn)行連鎖不平衡(linkage disequilibrium，LD)和單倍體型分析。以p＜0.05表示差異有統(tǒng)計學(xué)意義。
　　結(jié)果：
　　(1)EPOSNPrs1617640
　　等位基因結(jié)果:等位基因G的頻率在DR和DNR組間、PDR和DNR組間

8、、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　基因型結(jié)果:采用dominant、recessive和additive模型，基因型GG、GT、TT頻率分布在DR組和DNR組間、PDR組和DNR組間、NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)差異(p＞0.05)。
　　(2)EPOSNPrs507392
　　等位基因結(jié)果:等位基因C的頻率分布在DR和DNR組間、PDR和DNR組間、NPDR和DNR組間比

9、較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　基因型結(jié)果:采用recessive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR(OR=0.44,95％CI:0.22-0.86,p=0.012)和PDR組(OR=0.19,95％CI:0.06-0.66,p=0.003）均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。采用additive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR組（OR=0.45

10、,95％CI:0.23-0.89,p=0.027）和PDR組(OR=0.18,95％CI:0.05-0.63，p=0.002)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。采用dominant模型計算，DR組和DNR組間、PDR組和DNR組間、NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　(3)EPOSNPrs551238
　　等位基因結(jié)果:與DNR組比較，

11、等位基因C頻率在PDR組中明顯降低（OR=0.72，95％CI:0.52-0.99，P=0.049）;DR和DNR組間、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　基因型結(jié)果:采用recessive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR組(OR=0.40,95％CI:0.20-0.79,p=0.010)和PDR組(OR=0.18,95％CI:0.05-0.61,p=0.002)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義

12、;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。采用additive模型，與DNR組比較，基因型CC頻率在DR組(OR=0.42,95％CI:0.21-0.83,p=0.016)和PDR組(OR=0.18,95％CI:0.05-0.62，p=0.002)均明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;NPDR組和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。采用dominant模型，DR組和DNR組間、PDR組和DNR組間、NPDR組

13、和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　(4)連鎖不平衡和單倍體型分析
　　連鎖不平衡分析顯示EPO基因SNP位點rs1617640，rs507392和rs551238存在顯著連鎖不平衡(D'＞0.90)。對三個位點的單倍體型分析，未發(fā)現(xiàn)單倍體與DR、PDR和NPDR發(fā)病易感性之間存在顯著的相關(guān)性。
　　(5)TCF7L2SNPrs11196205
　　等位基因結(jié)果:等位基因C的頻率分布在DR和

14、DNR組間、DR和DNR組間、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(p＞0.05)。
　　基因型結(jié)果:采用dominant模型，基因型CC、CG、GG頻率分布在DR和DNR組間、PDR和DNR組間、NPDR和DNR組間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　EPO基因SNP位點rs507392和rs551238與T2DM患者DR和PDR發(fā)病具有顯著相關(guān)性，攜帶基因型CC患者DR和PDR疾病易感性