預(yù)構(gòu)復(fù)合肌骨組織瓣修復(fù)肢體嚴(yán)重損傷的動物模型與實驗研究.pdf

1、目的： 肢體的嚴(yán)重損傷所合并的各類組織缺損是臨床解決的重點難題，肢體復(fù)合組織缺損的修復(fù)十分困難，尤其是按臨床需要構(gòu)建一個與缺損組織相類似的復(fù)合組織是須解決的課題。預(yù)構(gòu)復(fù)合組織瓣是一種按一定的需要和設(shè)想，經(jīng)過設(shè)計，不受血管分布區(qū)的限制的組織瓣：通過手術(shù)的方法將知名的血管或含知名血管的筋膜、肌肉等組織移植于沒有軸型血管的供區(qū)的某一層次，或?qū)?fù)合肌骨組織瓣移植于含有知名血管束的組織上，經(jīng)過一段時間的重新血管化后，將非軸型組織瓣供區(qū)人為

2、地轉(zhuǎn)化為軸型組織瓣，成為具有一定功能、要求和特性的復(fù)合組織瓣，再按軸型血管組織瓣移植，使其更便于損傷組織的修復(fù)，更完美地恢復(fù)患者的功能與外形。為治療四肢嚴(yán)重損傷所并發(fā)組織缺損，本實驗設(shè)計了含肌肉、血管、神經(jīng)、骨骼、骨膜的預(yù)構(gòu)復(fù)合組織瓣的動物模型，并進行異位移植，修復(fù)肢體肌骨組織缺損材料和方法： 實驗動物：實驗用健康新西蘭大耳白兔，共24只，雌雄不限，2～3月齡；體重2.5～3.0kg。按擬移植物，隨機分為3組：A組：10只，擬植

3、入預(yù)構(gòu)復(fù)合肌骨組織瓣；B組：10只，擬植游離骨塊；C組：4只，單純制造前肢骨、軟組織缺損，以做對照。 麻醉方法：動物用3％戊巴比妥鈉按1ml/kg經(jīng)兔的耳緣靜脈實施麻醉，術(shù)中及術(shù)后注意觀察兔子的呼吸頻率和幅度。 手術(shù)方法；A組第一次手術(shù)：麻醉后，下腹部、腹股溝及后肢內(nèi)側(cè)區(qū)脫毛劑備皮；碘伏消毒術(shù)區(qū)，隨機取后肢內(nèi)側(cè)行弧形切口至膝關(guān)節(jié)處。顯露股內(nèi)側(cè)肌群和股外側(cè)肌群前內(nèi)側(cè)，切開股內(nèi)側(cè)肌即可直視股骨，自腹股溝開始，于屈肌肌群之間，

4、分離出股動靜脈、股神經(jīng)；繼續(xù)分離股動靜脈，直至找到至股內(nèi)側(cè)肌中下三分之一段的分支血管，多可見動靜脈伴行的骨神經(jīng)分支，分離肌肉，自股骨中下三分之一處鋸取長1cm的股骨(為方便鋸取股骨，可于股直肌止點處切斷股直肌，上翻，截骨后縫合)，于屈肌間分離出血管蒂。取肌骨瓣后，股骨缺損處以合適長度、直徑克氏針插入髓腔，充當(dāng)髓內(nèi)針固定。如血管蒂過短或位置不合適，應(yīng)斷蒂與管徑相仿股動靜脈分支吻合。向上翻轉(zhuǎn)肌骨瓣，置于鹽水紗布上，觀察5～15分鐘；硅膠片包

5、裹后，將肌骨瓣向下方移位，置于深淺兩層屈肌肌群之間預(yù)構(gòu)，肌骨瓣末端與深筋膜縫合固定，切口皮膚對合縫合，肌肉不縫合。刀口以慶大霉素濕敷，多層無菌紗布包扎。 A組第二次手術(shù)：在第1次手術(shù)后7～14天后，行第2次手術(shù)。沿原切口進入，逐層分離，小心顯露預(yù)構(gòu)肌骨復(fù)合瓣，然后斷蒂、修整后異位移植于兔前肢預(yù)制的橈骨肌骨缺損處，同時將預(yù)構(gòu)瓣內(nèi)血管、神經(jīng)與前肢血管、神經(jīng)吻合，吻合后繼續(xù)觀察5～15分鐘?？p合后以1cm×10cm木板充當(dāng)小夾板固定患

6、肢。斷蒂前隨機選取兩只兔子行血管染色，觀察預(yù)構(gòu)瓣血運。 B組：隨機選取兔前肢，脫毛劑備皮、消毒，于兔前臂橈骨側(cè)中上三分之一處鋸下長1cm橈骨，去除骨膜，生理鹽水浸泡后回植回原處，以7＃絲線捆扎于尺骨固定，縫合，包扎。 C組：單純鋸除1cm橈骨，適量切除肌肉，制造四肢骨質(zhì)缺損動物模型，作為對照。 觀察方法：直接觀察：在第1次手術(shù)后7～14天后，行第2次手術(shù)。取原切口，在肌肉間仔細分離、顯露植入組織瓣的起始段和植入端

7、。將此預(yù)構(gòu)瓣掀起展平放置于生理濕紗布上，觀察10～20分鐘。 血管染色觀察：實驗組中隨機選出2只行血管染色，顯微鏡鏡下觀察肌肉、血管、骨塊的著色情況。 影像學(xué)檢查：移植術(shù)后2周、4周、8周、12周，將動物捆綁或處死(第12周)后進行撓骨正位X線拍片，記錄骨缺損生長情況。 組織學(xué)檢查：移植術(shù)后4周、8周、12周隨機分批處死新西蘭兔，行影像學(xué)檢查后，分別取骨缺損斷端骨質(zhì)標(biāo)本和軟組織標(biāo)本，切片觀察。結(jié)果； A組

8、異位移植后有2例失敗，其余均異位移植成功。影像學(xué)、組織學(xué)觀察以及影像學(xué)檢查結(jié)果進行Lane-Sandhu組織學(xué)評分，進行統(tǒng)計學(xué)比較，證明A組骨痂出現(xiàn)時間，斷端皮質(zhì)橋接時間，骨髓腔出現(xiàn)時間，均早于B組；A組成骨細胞、新生骨細胞數(shù)量和出現(xiàn)骨島的數(shù)量多于同期B組。8周、12周A、B組X線檢查結(jié)果Lane-Sandhu組織學(xué)評分結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計學(xué)方法分析具有顯著性差異。 結(jié)論： 本次實驗建立了肢體損傷的兔模型，并在此模型上完成了預(yù)構(gòu)復(fù)

9、合肌骨組織瓣的建立、移位并獲得存活。此動物實驗證明了攜帶神經(jīng)、血管束、肌肉、骨膜、骨骼的預(yù)構(gòu)復(fù)合組織瓣的可行性。預(yù)構(gòu)復(fù)合肌骨組織瓣異位移植于兔橈骨骨缺損處，影像學(xué)、組織學(xué)、統(tǒng)計結(jié)果證明其加速組織缺損的修復(fù)再生，縮短骨缺損愈合時聞。預(yù)構(gòu)復(fù)合組織瓣位置較隱蔽，預(yù)構(gòu)的組織瓣具有骨質(zhì)支撐作用，組織瓣蒂耐扭曲及牽拉。預(yù)構(gòu)血管的管徑可選擇相對比較大的，可以提高組織瓣移轉(zhuǎn)時血管吻合的成功率。預(yù)構(gòu)組織瓣可不受正常血管供區(qū)的限制，按需要構(gòu)制復(fù)合肌骨組織瓣