黏著斑激酶對高轉(zhuǎn)移性腺樣囊性癌細胞生物學(xué)特性影響的初步研究.pdf

1、腺樣囊性癌是口腔頜面部常見的惡性腫瘤，其臨床生物學(xué)特征之一就是易發(fā)生轉(zhuǎn)移，這是其預(yù)后欠佳的重要原因，而對其轉(zhuǎn)移機制知之甚少。目前已發(fā)現(xiàn)，細胞內(nèi)信號分子FAK可以調(diào)節(jié)細胞的擴散、遷移、凋亡和存活等多種功能。有關(guān)FAK在有獨特生物學(xué)行為的腺樣囊性癌中的表達是否具有與其它腫瘤相同或相似的情況是值得關(guān)注的，但迄今國內(nèi)外尚未見FAK與腺樣囊性癌高轉(zhuǎn)移細胞株Acc-M的生長、體外侵襲能力和抗凋亡等生物學(xué)行為關(guān)系的研究報道。目的：通過對體外培養(yǎng)的腺樣

2、囊性癌高轉(zhuǎn)移細胞株Ace-M采用FAK反義寡核苷酸的轉(zhuǎn)染抑制FAK的表達的方法，探討FAK與高轉(zhuǎn)移性腺樣囊性癌細胞的生物學(xué)特性的關(guān)系及其作用機制。材料與方法：利用脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導(dǎo)的FAK寡核苷酸對Acc-M細胞進行轉(zhuǎn)染，將轉(zhuǎn)染的癌細胞應(yīng)用MTT法檢測，觀察不同組Acc-M細胞的生長情況；使用RT-PCR檢測Acc—M細胞株中FAK的表達，并結(jié)合免疫熒光顯微鏡觀察技術(shù)分析ASODN、SODN及對照組的不同表現(xiàn)分

3、析；Transwell小室技術(shù)，分析其侵襲能力；Tunel及FCM的方法檢測細胞凋亡情況。 結(jié)果：本研究在國內(nèi)外首次觀察到：(1)Ace—M細胞中存在粘著斑激酶的表達，主要定位于細胞漿。(2)本實驗設(shè)計的反義寡核苷酸可以在在mRNA和蛋白水平上顯著抑制FAK的表達(P<0.05)。(3)FAK的抑制對Ace-M細胞的生長和增殖有明顯的抑制作用。反義組腫瘤細胞的凋亡明顯增強與S。DN組、對照組則基本相似，幾乎無改變。(4)ASOD

4、N轉(zhuǎn)染組Acc-M細胞的黏附率和侵襲能力明顯降低。結(jié)論： (1)粘著斑激酶對Acc-M細胞增殖有明顯的促進作用，并能抑制腫瘤細胞凋亡，并可促進腫瘤細胞的侵襲性，可認為FAK是腺樣囊性癌侵襲轉(zhuǎn)移及抗失巢凋亡的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的重要信號分子(2)脂質(zhì)體Lipofectamine2000介導(dǎo)的FAK ASODN的轉(zhuǎn)染對Acc-M細胞的封閉效果明顯，可達到對FAK的特定的抑制，是一種簡便實用的研究方法。 綜上所述，腺樣囊性癌高轉(zhuǎn)移細胞株Ac