乳鐵蛋白抗輻射損傷作用的基礎研究.pdf

1、目的:
　　 隨著核技術的迅速發(fā)展，電離輻射的應用已經(jīng)發(fā)展到各個領域。工業(yè)、科研和醫(yī)學等領域使用的X射線探傷機、放射性同位素、X射線機、直線加速器等，一旦造成事故就會給人體造成不同程度的損傷。人體的多個系統(tǒng)如造血系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)和生殖系統(tǒng)對電離輻射非常敏感。因此，人體長期或者大劑量接受電離輻射，會引起細胞、組織和器官損傷，誘發(fā)各種疾病，誘發(fā)癌癥、白血病，甚至引起死亡。乳鐵蛋白是一種非血紅素鐵結合性糖蛋白，廣泛分布于哺乳動物的乳汁、

2、唾液、淚液等分泌物和血液、嗜中性粒細胞中。乳鐵蛋白已在多個領域表現(xiàn)出特有的生物活性，如促進腸道鐵吸收、抑菌與殺菌、抗氧化作用、免疫調(diào)節(jié)作用、促進腸道內(nèi)雙歧桿菌生長功能、抗感染作用、抗癌作用、藥物協(xié)同作用。2006年，日本研究人員通過動物實驗證實，乳鐵蛋白具有防止輻射損傷的功效，并認為這種作用與乳鐵蛋白的抗氧化作用有關。本課題通過研究乳鐵蛋白對輻射損傷小鼠抗氧化、免疫功能、細胞凋亡等的影響，進一步探討乳鐵蛋白對小鼠的抗輻射損傷作用及可能存

3、在的機制，為研究新型放射防護劑提供新的思路和方法。
　　 方法:
　　 首先研究乳鐵蛋白對小鼠輻射損傷的防護作用。36只SPF級Balb/c小鼠適應性飼養(yǎng)1周，觀察無異常后參照隨機區(qū)組法分組，隨機分為正常對照組、照射對照組和hLF組，每組12只，照射對照組和hLF組給予2 GyX射線全身照射。照射后hLF組每只小鼠腹腔注射4.0 mg/ml的乳鐵蛋白溶液1.0 ml;正常對照組和照射對照組腹腔注射0.9％氯化鈉注射液各1

4、.0 ml，各組小鼠自由飲食。照射后24 h，處死小鼠取材，檢測免疫器官指數(shù)、T淋巴細胞亞群比例、血清SOD活力、MDA水平、外周血象。另取Balb/c小鼠30只，分組、照射、給藥及飲食方式同上述實驗。給藥20 h后，每組小鼠腹腔注射體積分數(shù)為5％雞紅細胞懸液1.0 ml，4h后，取材，檢測腹腔巨噬細胞吞噬功能。
　　 第二是研究乳鐵蛋白對脾細胞凋亡和細胞因子的影響。取Balb/c小鼠30只，分組同上述實驗。hLF組按50 mg

5、/kg hLF灌胃給藥，1次/d，連續(xù)7d;正常對照組和照射對照組灌胃0.9％氯化鈉注射液，20 ml/kg，1次/d，共7d。末次給藥后2h，照射對照組和hLF組給予2 GyX射線全身照射，各組小鼠自由飲食。照射后24 h，處死小鼠取材，檢測脾細胞凋亡、血清Bcl-2、IL-1β、IL-2。
　　 結果:
　　 乳鐵蛋白對小鼠輻射損傷的防護作用實驗。實驗結果發(fā)現(xiàn)，照射后，照射對照組和hLF組小鼠與正常對照組比較，小鼠胸

6、腺和脾臟指數(shù)、CD8+淋巴細胞比例、SOD活力、WBC、LYM％、腹腔巨噬細胞吞噬指數(shù)和吞噬百分率均顯著降低(P＜0.01)，而MDA水平、CD4+淋巴細胞比例均顯著增高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01); hLF組小鼠脾臟和胸腺指數(shù)、CD4+、CD8+淋巴細胞比例、SOD活力、LYM％、腹腔巨噬細胞吞噬指數(shù)和吞噬百分率明顯高于照射對照組（P＜0.01，P＜0.05），而MDA水平顯著低于照射對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。<

7、br>　　 乳鐵蛋白對脾細胞凋亡和細胞因子的影響實驗。實驗結果發(fā)現(xiàn)，照射后，小鼠脾細胞凋亡增多，照射對照組小鼠脾細胞凋亡的細胞比例（包括早期凋亡細胞和晚期凋亡細胞）顯著高于正常對照組，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05); hLF組小鼠脾細胞凋亡細胞的比例正常對照組有所升高，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);hLF組小鼠脾細胞凋亡細胞的比例顯著低于照射對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。hLF組小鼠血清Bcl-2、IL-1β、IL

8、-2濃度顯著高于照射對照組，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05）。
　　 結論:
　　 1.免疫器官指數(shù)計算結果提示乳鐵蛋白可能能夠防止電離輻射引起的胸腺和脾臟的過度損傷并促進其恢復。
　　 2.脾臟T淋巴細胞亞群和腹腔巨噬細胞吞噬實驗證實乳鐵蛋白對電離輻射引起的免疫功能損傷具有保護作用。
　　 3.抗氧化實驗的結果提示乳鐵蛋白可提高電離輻射損傷后小鼠機體內(nèi)清除自由基的能力和抗氧化能力。
　　 4.乳