版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請(qǐng)進(jìn)行舉報(bào)或認(rèn)領(lǐng)
文檔簡(jiǎn)介
1、乳鐵蛋白是一種具有抗菌、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)等多功能性鐵結(jié)合糖蛋白,它廣泛存在于哺乳動(dòng)物乳汁中,一些外分泌物如淚液、滑液、唾液等也含有少量乳鐵蛋白。近年來發(fā)現(xiàn)乳鐵蛋白對(duì)骨生長(zhǎng)和代謝的作用逐漸成為研究熱點(diǎn)。本研究從新鮮牛乳中分離純化得到乳鐵蛋白,研究乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞增殖作用影響,考察乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響,同時(shí)研究不同加熱處理參數(shù)對(duì)乳鐵蛋白成骨活性影響及對(duì)成骨細(xì)胞MAPK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路影響,進(jìn)而為乳鐵蛋白在工業(yè)化生產(chǎn)中的應(yīng)
2、用工藝開發(fā)奠定一定的理論基礎(chǔ)。
本研究以新鮮牛乳為原料,通過脫脂、除酪蛋白、SP Sepharose Big Bead離子交換層析、Superdex200凝膠層析、超濾除鹽濃縮及真空冷凍干燥等一系列過程,最終獲得乳鐵蛋白純品。在純化過程中對(duì)Superdex200層析條件進(jìn)行優(yōu)化,通過優(yōu)化條件來分離純化乳鐵蛋白,得到乳鐵蛋白分子量約為76kDa,乳鐵蛋白純度約為93.82%,得率為68.19%。通過差示掃描量熱法測(cè)定得到的乳鐵蛋
3、白熱變性溫度為70.4℃和88.2℃。綜合考慮乳鐵蛋白熱變性溫度及實(shí)際生產(chǎn)加工中乳的熱處理參數(shù),設(shè)置以下加熱參數(shù):62-65℃加熱處理30min、72℃加熱處理10s、85℃加熱處理10min、95℃加熱處理10min對(duì)乳鐵蛋白進(jìn)行熱處理,進(jìn)而考察熱處理對(duì)乳鐵蛋白活性的影響。
從新生SD乳鼠中提取成骨細(xì)胞,通過形態(tài)觀察、HE染色、堿性磷酸酶染色及礦化結(jié)節(jié)染色來鑒定成骨細(xì)胞。運(yùn)用MTT法進(jìn)行細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn),比較不同加熱處理乳鐵蛋白
4、對(duì)成骨細(xì)胞增殖影響。研究結(jié)果表明未加熱乳鐵蛋白能顯著促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖,且在生理濃度(1-100μg/mL)范圍內(nèi)呈劑量依賴關(guān)系。與未加熱乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞增殖作用相比,62-65℃加熱處理低濃度乳鐵蛋白(1、10、50μg/mL)對(duì)成骨細(xì)增殖作用無顯著變化,而處理高濃度乳鐵蛋白(1000、1250、1500μg/mL)則會(huì)顯著降低對(duì)成骨細(xì)胞增殖作用;72℃加熱處理乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞作用,作用24h時(shí),低濃度(1、10μg/mL)對(duì)成骨細(xì)
5、胞增殖作用顯著提高,作用48、72h時(shí)則無顯著變化,72℃加熱處理高濃度乳鐵蛋白(1000、1250、1500μg/mL),作用24h、48h會(huì)顯著降低對(duì)成骨細(xì)胞增殖作用,作用72h則無顯著作用;85℃加熱處理和95℃加熱處理濃度高于50μg/mL乳鐵蛋白都會(huì)顯著降低對(duì)成骨細(xì)胞增殖作用。
研究乳鐵蛋白對(duì)成骨細(xì)胞MAPK信號(hào)通路影響發(fā)現(xiàn):乳鐵蛋白可通過介導(dǎo)ERK1/2、p38MAPK、JNK亞通路來促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖,通過介導(dǎo)ER
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請(qǐng)下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請(qǐng)聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會(huì)有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲(chǔ)空間,僅對(duì)用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護(hù)處理,對(duì)用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對(duì)任何下載內(nèi)容負(fù)責(zé)。
- 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請(qǐng)與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時(shí)也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對(duì)自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 熱處理對(duì)乳鐵蛋白結(jié)構(gòu)及促成骨細(xì)胞增殖活性的影響.pdf
- 加工處理?xiàng)l件及來源對(duì)乳鐵蛋白及乳鐵蛋白素在脾淋巴細(xì)胞增殖中的影響.pdf
- 乳鐵蛋白抗菌肽抗胃癌及作用機(jī)制的研究.pdf
- 乳鐵蛋白對(duì)油酸致大鼠急性肺損傷的影響及機(jī)制.pdf
- 外源乳鐵蛋白對(duì)斷奶仔豬增重、細(xì)胞因子及內(nèi)源乳鐵蛋白基因表達(dá)影響的研究.pdf
- 乳鐵蛋白對(duì)T細(xì)胞及腸道粘膜發(fā)育的影響.pdf
- 天然乳鐵蛋白和重組乳鐵蛋白的體內(nèi)、體外抗菌效果及機(jī)理研究.pdf
- 乳鐵蛋白對(duì)銅綠假單胞菌的殺菌作用及其機(jī)制研究.pdf
- 乳鐵蛋白的分離工藝研究
- 乳鐵蛋白免疫調(diào)節(jié)作用的研究.pdf
- 高壓脈沖電場(chǎng)對(duì)乳鐵蛋白結(jié)構(gòu)和生物活性功能的影響.pdf
- 乳鐵蛋白對(duì)脂多糖誘導(dǎo)小鼠急性肺損傷的保護(hù)作用及機(jī)制.pdf
- 牛乳中乳鐵蛋白與酪蛋白相互作用機(jī)制研究.pdf
- 乳鐵蛋白對(duì)去卵巢大鼠骨代謝和相關(guān)細(xì)胞因子的影響.pdf
- 潔澤復(fù)方對(duì)小鼠陰道表面活性蛋白D和乳鐵蛋白影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf
- 乳鐵蛋白的仿生親和純化研究.pdf
- 乳鐵蛋白特性評(píng)價(jià)與研究.pdf
- 乳鐵蛋白對(duì)人牙周膜細(xì)胞增殖遷移分化的影響.pdf
- 乳鐵蛋白素對(duì)Jurkat細(xì)胞增殖、分化和凋亡機(jī)制的研究.pdf
- 乳鐵蛋白分子組成對(duì)成骨細(xì)胞增殖活性的影響研究.pdf
評(píng)論
0/150
提交評(píng)論