基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α-趨化因子受體-4與糖尿病微血管病變關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、本文對(duì)基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α/趨化因子受體-4與糖尿病微血管病變關(guān)系進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)研究。 目的：研究糖尿病大鼠視網(wǎng)膜病變和糖尿病肌病變中基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α(SDF-1α)及趨化性細(xì)胞因子受體-4(CXCR-4)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的表達(dá)及意義。 方法：雄性S-D大鼠，體重200±20g，標(biāo)準(zhǔn)化飼養(yǎng)，設(shè)糖尿病(DM)和正常對(duì)照(NC)兩大組，每組分2周組(2wk)、4周組(4wk)、8周組(8wk)、12周組(1

2、2wk)、20周組(20wk)五個(gè)觀察點(diǎn)，每個(gè)時(shí)點(diǎn)8只。用鏈脲佐菌素(STZ)一次性腹腔內(nèi)注射誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型，正常組以等體積檸檬酸鹽緩沖液一次性腹腔內(nèi)注射。處死前稱大鼠體重、測空腹血糖，采用ELISA法測外周血SDF-1α濃度；取視網(wǎng)膜和心肌組織，采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)技術(shù)(RT-PCR)檢測SDF-1α、CXCR-4和VEGF mRNA表達(dá)；經(jīng)PBS和多聚甲醛灌注后取視網(wǎng)膜消化鋪片和心肌切片，S-P免疫組化學(xué)染色半定量分析S

3、DF-1 α、CXCR-4和VEGF的表達(dá)變化，視網(wǎng)膜血管HE染色觀察形態(tài)學(xué)改變，透射電鏡觀察視網(wǎng)膜微血管超微結(jié)構(gòu)的變化、vWF染色觀察心肌微血管數(shù)量變化：Western blot檢測視網(wǎng)膜組織和心肌組織SDF-1α、CXCR-4和VEGF的表達(dá)，分析各指標(biāo)的相關(guān)性。 結(jié)果：(1)DM組大鼠均成模，與NC組比較，DM組食量、飲水量及尿量均顯著增加，同時(shí)血糖顯著增高且體重增長顯著緩慢(P<0.01)。(2)與NC組比較，DM組外周

4、血SDF-la水平于4wk即有升高，8wk增高明顯p<0.01)，DM組隨病程延長逐漸增高，NC組隨周齡無明顯改變(P>0.05)。(3)DM大鼠見視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞減少、無細(xì)胞毛細(xì)血管增多，心肌微血管密度降低；透射電鏡可見視網(wǎng)膜周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的病理改變。(4)與NC組比較，DM組視網(wǎng)膜組織SDF-la、CXCR-4、VEGF在mRNA和蛋白水平均隨病程延長而增高(P<0.05)，于20wk增高最明顯；NC組隨周齡延長SDF-

5、la、CXCR-4和VEGF在mRNA和蛋白水平表達(dá)均無明顯改變(P>0.05)。(5)與NC組比較，DM組心肌組織SDF-la、CXCR-4在mRNA和蛋白水平表達(dá)均隨病程延長而增高(P<0.05)，于20wk增高最明顯，而VEGF在mRNA和蛋白水平均未見明顯增高(P>0.05)； NC組隨周齡延長SDF-la、CXCR-4和VEGF mRNA和蛋白表達(dá)均無明顯改變(P>0.05)。 結(jié)論：DM大鼠視網(wǎng)膜病變中SDF-la、