小鼠基因IMDS-60的cDNA克隆與初步性質(zhì)研究以及附睪特異基因Bin1b蛋白水平的初步研究.pdf

1、附睪作為避孕靶組織具有極少的內(nèi)分泌和遺傳副作用，研究附睪的功能及精子成熟過(guò)程有助于新型男性避孕藥物的設(shè)計(jì)和開發(fā)?；騃MDS-60的EST首先發(fā)現(xiàn)于子宮，卻在附睪里有較高表達(dá)。本文的工作致力于附睪中IMDS-60基因全長(zhǎng)cDNA的克隆和初步研究，以及附睪特異基因Binlb蛋白水平的相關(guān)研究，為進(jìn)一步研究這些基因在附睪中的功能打下基礎(chǔ)。 通過(guò)同源EST搜索和PCR的方法，在小鼠附睪里取得IMDS-60基因帶完整開放閱讀框的cDNA

2、序列，它編碼的氨基酸與C130090K23Rik基因序列(來(lái)自Mus musculus，16天胚胎頭部)編碼的氨基酸100％相同。Northern雜交的結(jié)果表明IMDS-60 mRNA在子宮、附睪、精囊腺和胃的樣品中均有表達(dá)，其中又以在附睪中的表達(dá)豐度最高，其表達(dá)受雄激素正調(diào)控，表達(dá)量從3周齡到成年期最高。 為了對(duì)大鼠附睪特異表達(dá)的beta-defensin Binlb的功能提供佐證，我們從三個(gè)方面進(jìn)行了研究。利用大鼠Binlb

3、在小鼠中的同源基因mBinlb的抗體進(jìn)行免疫組化實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)mBinlb蛋白存在于附睪頭部靠近體部區(qū)域，并能與小鼠精子結(jié)合，結(jié)合信號(hào)集中在精子頭部頂體后(post-acrosome)區(qū)域，這與大鼠Binlb的結(jié)合模式類似，下一步將研究mBinlb是否也促進(jìn)精子運(yùn)動(dòng)：構(gòu)建了非附睪特異beta-defensin RBD-1的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞株，體外抗菌活性實(shí)驗(yàn)表明細(xì)胞分泌的RBD-1具有抗菌活性，這為下一步進(jìn)行大鼠Binlb與RBD-1促使精子運(yùn)動(dòng)