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文檔簡介
1、目的:從肉眼大體表面形態(tài)觀察和掃描電子顯微鏡觀察,細菌培養(yǎng)及鑒定,內(nèi)毒素含量定性和定量測定三大方面認識血液透析水處理系統(tǒng)PVC管道內(nèi)表面生物膜。同時測定中南大學(xué)湘雅二醫(yī)院新、舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲水和透析液的內(nèi)毒素含量。 方法:選擇血液透析水處理系統(tǒng)PVC管道中有代表性的點,軟水器后點,活性炭罐后點,反滲機前點,反滲機后點,動力泵出口點,死腔1點,死腔2點,共7處位置進行研究。取反滲機前點、反滲機后點管樣進行管道內(nèi)表面肉眼大體
2、表面形態(tài)觀察和掃描電子顯微鏡觀察。取反滲機前點、反滲機后點管樣,將內(nèi)表面生物膜制成溶液,在23攝氏度,37攝氏度條件下進行血瓊脂培養(yǎng)基中細菌培養(yǎng)菌落計數(shù)及種類鑒定。將所有管樣內(nèi)表面生物膜制成溶液,進行內(nèi)毒素定性及定量測定。取舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲水、透析液,新血液透析水處理系統(tǒng)反滲水、透析液,進行內(nèi)毒素含量定性及定量測定。 結(jié)果: 1.舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲機前點,反滲機后點PVC管道內(nèi)表面生物膜形態(tài)學(xué)觀察
3、(1)肉眼表面大體形態(tài)觀察結(jié)果 反滲機前點管道內(nèi)表面呈棕褐色,有活性炭粉末沉積,均勻分布;反滲機后點管道內(nèi)表面顏色無特殊改變,也無明顯雜質(zhì)附著痕跡。 (2)掃描電子顯微鏡觀察結(jié)果 反滲機前點的水處理系統(tǒng)PVC管道中存在細菌生物膜,主要由成簇狀生長的桿菌、球形細菌和活性炭粉末混雜而成,也可見到細菌細胞外基質(zhì)脫水后形成的特殊纖維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu),膜面連續(xù),呈多層結(jié)構(gòu)。反滲機后點的水處理系統(tǒng)PVC管道中生物膜形態(tài)與反滲機前點相
4、比,也存在形狀大小相同的細菌,但數(shù)量極少,結(jié)構(gòu)松散。 2.舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲機前點,反滲機后點PVC管道內(nèi)表面生物膜細菌培養(yǎng)及鑒定 (1)血瓊脂培養(yǎng)基37℃培養(yǎng)結(jié)果 反滲機前點1號標(biāo)本菌落計數(shù)為600CFU/ml,染色為革蘭氏陽性桿菌,種類為枯草桿菌;反滲機前點2號標(biāo)本菌落計數(shù)為300CFU/ml,染色為革蘭氏陽性球菌,種類為微球菌;反滲機前點3號標(biāo)本菌落計數(shù)為1200CFU/ml,染色有革蘭氏陽性桿菌,種
5、類為枯草桿菌,有革蘭氏陰性桿菌,種類為莫拉氏菌屬;反滲機后點4號、5號標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果為陰性;反滲機后點6號標(biāo)本菌落計數(shù)為100 CFU/ml,染色為革蘭氏陽性球菌,為微球菌。 (2)血瓊脂培養(yǎng)基23℃培養(yǎng)結(jié)果 反滲機前點1號標(biāo)本菌落計數(shù)為4000CFU/ml,染色為革蘭氏陰性桿菌,種類為皮氏伯克霍爾德菌和腐敗假單胞菌;反滲機前點2號標(biāo)本菌落計數(shù)為2500CFU/ml,染色為革蘭氏陽性球菌,種類為微球菌;反滲機前點3號標(biāo)本
6、菌落計數(shù)為1500CFU/ml,染色為革蘭氏陰性桿菌,種類為枯草桿菌;反滲機后點4號標(biāo)本、5號標(biāo)本、6號標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果均陰性。 3.舊血液透析水處理系統(tǒng)PVC管道樣本內(nèi)表面生物膜內(nèi)毒素含量的測定 (1)定性測定結(jié)果 測得軟水器后點,活性炭罐后點,反滲機前點,反滲機后點,動力泵出口點,死腔1點,死腔2點管道樣本內(nèi)表面生物膜含量均大致在2.0~4.OEU/ml區(qū)間。 (2)定量測定結(jié)果 測得各樣本內(nèi)毒素
7、含量為軟水器后點2.821±0.807EU/ml,活性炭罐后點3.635±0.427EU/ml,反滲機前點3.687±0.271EU/ml,反滲機后點2.041±0.295EU/ml,動力泵出口點1.983±0.390EU/ml,死腔1點2.373±0.535EU/ml,死腔2點2.858±0.690EU/ml,空白對照(無菌生理鹽水)0.212±0.013EU/ml。 反滲機上游各點與反滲機下游各點管道內(nèi)表面生物膜濃度相比,軟
8、水器后點高于反滲機后點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05;軟水器后點高于動力泵出口點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05;活性炭罐后點高于反滲機后點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01;活性炭罐后點高于動力泵出口點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01;活性炭罐后點高于死腔1點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01;活性炭罐后點高于死腔2點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05;反滲機前點高于反滲機后點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01;反滲機前點高于動力泵出口點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01;
9、反滲機前點高于死腔1點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.01:反滲機前點高于死腔2點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05。 反滲機上游各點管道內(nèi)表面內(nèi)毒素含量之間互相比較,活性炭罐后點高于軟水器后點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05;反滲機前點高于軟水器后點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05。 反滲機下游各點管道內(nèi)表面內(nèi)毒素含量之間互相比較,反滲機后點低于死腔2點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05;動力泵出口點低于死腔2點,有統(tǒng)計學(xué)意義,P<0.05。
10、 4.新舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲水和透析液的內(nèi)毒素含量測定 (1)定性測定結(jié)果 新血液透析水處理系統(tǒng)反滲水和透析液內(nèi)毒素含量均小于0.25 HU/ml,舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲水內(nèi)毒素含量小于0.25 EU/ml,舊血液透析水處理系統(tǒng)透析液內(nèi)毒素含量小于0.5 HU/ml,大于0.25 HU/ml。 (2)定量測定結(jié)果 各樣本內(nèi)毒素含量為新血液透析水處理系統(tǒng)反滲水0.015±0.108 EU/ml;
11、新血液透析水處理系統(tǒng)透析液0.093±0.035 EU/ml;舊血液透析水處理系統(tǒng)反滲水0.134±0.041EU/ml;舊血液透析水處理系統(tǒng)透析液0.483±0.081 EU/ml; 結(jié)論: 1.血液透析水處理系統(tǒng)反滲機前后PVC管道內(nèi)表面存在生物膜。 2.血液透析水處理系統(tǒng)PVC管道內(nèi)表面生物膜溶液細菌培養(yǎng),反滲機前點以革蘭氏陰性桿菌為主;反滲機后點僅培養(yǎng)出革蘭氏陽性球菌微球菌。 3.從活性炭罐后點
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