Ep-CAM在食管黏膜病變和血清中表達的水平及意義.pdf

1、目的：在世界范圍內(nèi)食管癌發(fā)病率占惡性腫瘤第九位，在我國居于第二位，目前治療食管癌的方法主要是外科手術(shù)結(jié)合放、化療的綜合治療，但食管癌治療效果仍不理想，5年生存率低于30％。如何早期發(fā)現(xiàn)食管腫瘤，及早控制食管癌前病變的發(fā)展，提高生存率，延長食管癌患者生存時間，一直是醫(yī)療工作者關(guān)注的課題之一。上皮細胞黏附分子(epithelial cellular adhesion molecule，Ep-CAM)是一種分子量為40kD的Ⅰ型跨膜糖蛋白，屬

2、Ca<'2+>非依賴性黏附分子，由腫瘤相關(guān)鈣信號轉(zhuǎn)導(dǎo)蛋白基因(tumor-associated calciumsignal transducer 1，TACSTD1)編碼。其功能可能涉及細胞間或上皮細胞基質(zhì)的黏附，與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移關(guān)系密切。在國外針對EP-CAM的報道，較深入的研究主要集中在乳腺癌，結(jié)腸癌，肺癌的研究上，針對食管癌的研究為數(shù)不多，也主要是對食管腺癌的分析。本實驗應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測EP-CAM在正常食管黏膜

3、、食管不典型增生和食管鱗癌組織的表達，以及應(yīng)用酶聯(lián)免疫(EIJSA)的方法檢測患者血清中EP-CAM的表達水平，探討其在食管癌監(jiān)測和治療中的指導(dǎo)意義。 方法：食管癌、食管增生的病理組織標本和血清來自河北醫(yī)科大學(xué)第四醫(yī)院胸外科和河北省磁縣醫(yī)院。食管癌例32例，其中25例經(jīng)手術(shù)治療；食管不典型增生的病例28例，組織取材為胃鏡咬檢的組織塊；取食管癌手術(shù)遠端，病理診斷為正常的食管黏膜10例作為正常組織對照。食管癌患者的血清為術(shù)前1天和術(shù)

4、后第7天患者開始進食后采取；食管不典型增生患者的血清為胃鏡檢查前出凝血時間檢測剩余后的血清；正常血清取11例身體健康的獻血員血清作為正常血清對照。應(yīng)用免疫組織化學(xué)的方法檢測Ep-CAM在食管癌、癌前病變組織中的表達；根據(jù)Dako評分系統(tǒng)，0-----3+的評分標準：0--不顯色或少于10％的腫瘤細胞呈現(xiàn)任何水平的陽性染色；1+----超過10％的腫瘤細胞膜呈現(xiàn)微弱染色，只在部分細胞膜上染色；2+--+超過10％的腫瘤細胞膜全部弱染色；3

5、+----超過10％的腫瘤細胞膜全部呈現(xiàn)強染色。應(yīng)用酶聯(lián)免疫(ELISA)的方法檢測血清Ep-CAM水平。結(jié)果判斷：每個標準品和標本的OD值應(yīng)減去零孔的OD值，根據(jù)標準品濃度及吸光度做出標準曲線，根據(jù)各待測樣品吸光度在標準曲線上讀出相應(yīng)濃度，再根據(jù)稀釋倍數(shù)計算出實際濃度。 統(tǒng)計學(xué)方法：應(yīng)用秩和檢驗或x<'2>檢驗對Dako評分數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學(xué)分析，應(yīng)用t檢驗和方差分析對血清Ep-CAM水平進行統(tǒng)計學(xué)分析。P≤0.05表明有統(tǒng)計學(xué)意

6、義。 結(jié)果：1 Ep-CAM在正常食管黏膜、食管不典型增生、食管癌組織中的表達：在10例正常食管黏膜組織中，Ep-CAM表達均為陰性，但在28例食管不典型增生組織中，表達陽性率為42.9％(12/28)，但其表達強度明顯低于食管癌組織。在25例食管癌的組織中，表達陽性率為96％(24/25)。三組表達的陽性率差異明顯(P<0.05)。2 Ep-CAM在正常食管、食管黏膜不典型增生、食管癌患者血清中的表達：三組間Ep-CAM的水平

7、存在明顯的差異(P<0.01)。食管癌患者血清中的Ep-CAM水平最高，其次為食管不典型增生的患者。食管正常者血清中的。Ep-CAM水平最低。3 食管黏膜不同程度增生患者血清中Ep-CAM表達水平：將食管黏膜不典型增生患者依據(jù)病理學(xué)診斷標準分為輕、中、重三級，其中，中、重度不典型增生患者血清中的Ep-CAM表達水平明顯高于輕度組，經(jīng)統(tǒng)計學(xué)檢驗，差異明顯(P=0.038)。中、重度不典型增生患者兩組間的Ep-CAM表達水平無明顯差異(P>

8、0.05)。4 血清中Ep-CAM水平與食管癌病理學(xué)特征的關(guān)系：根據(jù)患者術(shù)后的病理學(xué)特征進行分組，患者血清中Ep-CAM水平與腫瘤的大小、侵潤深度、分化程度無明顯相關(guān)(p>0.05)；但與腫瘤是否轉(zhuǎn)移明顯正相關(guān)(P=0.006)。5血清中Ep-CAM水平在食管癌切除手術(shù)前后的水平變化：血清中Ep-CAM在食管癌手術(shù)切除后，表達水平明顯下降(P<0.001)。術(shù)后7天，其水平接近于正常水平。 結(jié)論：1 食管黏膜癌前病變的早期階段即