圓錐動脈干畸形遺傳學(xué)研究.pdf

1、第一部分非綜合征性圓錐動脈干畸形中染色體22q11.2缺失調(diào)查 [目的]調(diào)查中國人非綜合征性圓錐動脈干畸形患者染色體22q11.2微缺失發(fā)生情況。 [方法]運(yùn)用熒光原位雜交方法對36名非綜合征性圓錐動脈干畸形患兒血液標(biāo)本染色體22q11.2微缺失進(jìn)行檢查，其中男性23例、女性13例，年齡2.74±2.50歲，病種為法樂氏四聯(lián)征21例、右室雙出口9例、先天性校正性大動脈轉(zhuǎn)位1例、肺動脈閉鎖合并室間隔缺損1例、完全性大動脈轉(zhuǎn)

2、位4例。探針為N25/N85A3探針。 [結(jié)論]染色體22q11.2微缺失為部分非綜合征性圓錐動脈干畸形患者的致病原因。 第二部分短串聯(lián)重復(fù)序列基因分型行22q11.2缺失調(diào)查的方法學(xué)研究 [目的]研究短串聯(lián)重復(fù)序列基因分型染色體22q11.2微缺失篩查方法的可行性。 [方法]研究對象同第一部分。選取22q11.2中D22S1638、D22S1648、D22S941、D22S944、D22S1623、D2

3、2S264、D22S311、D22S1709等8個短串聯(lián)重復(fù)序列，通過PCR方法對該8個短串聯(lián)重復(fù)序列進(jìn)行基因分型。計算各短串聯(lián)重復(fù)序列雜合度和純合度以及按雜合度大小依次引入短串聯(lián)重復(fù)序列后不同短串聯(lián)重復(fù)序列組合純合狀態(tài)發(fā)生率和與FISH相比染色體22q11.2微缺失診斷特異性。 [結(jié)論]短串聯(lián)重復(fù)序列基因分型可以作為檢測染色體22q11.2微缺失的篩查方法，短串聯(lián)重復(fù)序列組合純合發(fā)生率小于0.05作為選擇短串聯(lián)重復(fù)序列組合的標(biāo)

4、準(zhǔn)具有較高的診斷特異性。 第三部分圓錐動脈干畸形22q11.2缺失遺傳嵌合研究 [目的]研究遺傳嵌合現(xiàn)象在非綜合征性圓錐動脈干畸形發(fā)病機(jī)制中的作用。 [方法]第一部分研究對象中，除4例完全性大動脈轉(zhuǎn)位患兒無法取得心肌標(biāo)本排除在本次研究之外，其余32名患兒納入本次研究，其中男性20例、女性12例，年齡2.70±2.08歲。收集患者血液和心肌標(biāo)本，通過PCR方法對血液和心肌標(biāo)本染色體22q11.2及附近D22S420

5、、D22S427、D22S1638、D22S1648、D22S941、D22S944、D22S1623、D22S264、D22S311、D22S1709、D22S306、D22S425、D22S257、D22S301、D22S1144等15個短串聯(lián)重復(fù)序列進(jìn)行基因分型，比較血液和心肌標(biāo)本短串聯(lián)重復(fù)序列基因型的異同。 [結(jié)論]遺傳嵌合現(xiàn)象可能不是非綜合征性圓錐動脈干畸形的發(fā)病機(jī)制。 第四部分圓錐動脈干畸形候選致病基因TBX

6、1單核苷酸多態(tài)性調(diào)查 [目的]掃描無染色體22q11.2微缺失圓錐動脈干畸形患者血細(xì)胞TBX1基因外顯子，以期發(fā)現(xiàn)突變位點(diǎn)或單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn)。 [方法]第一部分中所有33名無染色體22q11.2微缺失的患者為本部分研究對象，其中男性21例、女性12例，年齡2.9391±2.5157歲，病種為法樂氏四聯(lián)征19例、右室雙出口8例、先天性校正性大動脈轉(zhuǎn)位1例、肺動脈閉鎖合并室間隔缺損1例、完全性大動脈轉(zhuǎn)位4例；對照組為66名