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文檔簡介
1、目的:在前期實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)上,進(jìn)一步研究基于補(bǔ)腎調(diào)沖法的通脈大生片對腎虛排卵障礙不孕大鼠TGF-β1/Smads通路上的信號(hào)蛋白平衡表達(dá)調(diào)控的干預(yù)作用,為補(bǔ)腎調(diào)沖法治療排卵障礙型不孕癥提供科學(xué)依據(jù),為排卵障礙型不孕癥實(shí)質(zhì)的深入研究提供客觀依據(jù)和理論基礎(chǔ)。
方法:選取9日齡雌性SD大鼠,通過頸背部皮下注射丙酸睪酮,建立腎虛排卵障礙型不孕大鼠(Androgen induced sterile rats,ASR)模型,根據(jù)大鼠一般情
2、況及陰道脫落細(xì)胞學(xué)涂片的表現(xiàn),將造模成功大鼠隨機(jī)分為模型組、通脈大生片高劑量組(簡稱通高組)、中劑量組(簡稱通中組)、低劑量組(簡稱通低組)、來曲唑組(letrozole,LE)、右歸丸組,加之未做任何干預(yù)的正常組,總計(jì)七個(gè)組。給藥組于大鼠第80日齡,藥物連續(xù)干預(yù)5周后股動(dòng)脈取血分離出血清(采用酶聯(lián)免疫法檢測TGF-β1含量),迅速剝離大鼠兩側(cè)卵巢以備檢測(左側(cè)卵巢于液氮凍存,采用蛋白免疫印跡法檢測大鼠卵巢Smad4、Smad7的表達(dá)水
3、平;右側(cè)卵巢于10%甲醛中固定,采用免疫組化法檢測TGF-β1R含量)。
結(jié)果:
1、模型組的大鼠卵巢TGF-β1的表達(dá)量最低,與正常組、來曲唑組大鼠卵巢相比,差異有顯著意義(P<0.01),與通高組、右歸丸組相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與通中組、通低組無差異(P>0.05)。通脈大生片各劑量組的TGF-β1表達(dá)量以通高組最高。
2、與模型組相比各用藥組的TGF-β1R表達(dá)量均有所升高,其中以通
4、高組及來曲唑組陽性表達(dá)率最高,右歸丸組與通中組陽性表達(dá)率相同。
3、模型組的大鼠卵巢Smad4的表達(dá)水平最低,與正常組、通高組、來曲唑組的表達(dá)水平相比,差異有顯著意義(P<0.01),與右歸丸組、通中組的表達(dá)水平相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),與通低組無差異(P>0.05),以通高組和來曲唑組效果最優(yōu)。
4、模型組的大鼠卵巢Smad7的表達(dá)水平最高,與正常組、通高組、通中組、來曲唑組、右歸丸組的表達(dá)水平相比,
5、差異有顯著意義(P<0.01),與通低組的表達(dá)水平相比,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),通高組和來曲唑組的大鼠卵巢Smad7的表達(dá)水平最低。
結(jié)論:
1、腎虛排卵障礙不孕大鼠存在TGF-β/smads信號(hào)通路的平衡失調(diào),通脈大生片可上調(diào)大鼠卵巢Smad4蛋白表達(dá),下調(diào)Smad7蛋白表達(dá),通過調(diào)控smads蛋白的表達(dá)水平,進(jìn)而改善卵巢局部的微環(huán)境。
2、通脈大生片可增加大鼠卵巢信號(hào)傳導(dǎo)因子TGF-β1、TGF-
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