刺五加、滑菇多糖提取工藝的優(yōu)化與建立.pdf

1、目前市場上的多糖制劑多為單一制劑，如黃芪多糖、香菇多糖、裂褶菌多糖、云芝肝泰等，具有提高免疫力、抗腫瘤等多種功效。近年來，復(fù)合多糖己成為一個國內(nèi)外新的研究熱點，并相繼有類似產(chǎn)品推出，如國內(nèi)的“無限極口服液”、“莎克來復(fù)合多糖膠囊”，源于新西蘭的“甘諾寶力”等。但這些復(fù)合多糖制劑均為真菌復(fù)合多糖制劑，而基于“配伍理論”將植物多糖與真菌多糖的復(fù)合多糖制劑在國內(nèi)外未見產(chǎn)品上市。本研究著眼于開發(fā)植物與真菌多糖的復(fù)合制劑，對植物多糖、真菌多糖提取

2、制備過程中的技術(shù)環(huán)節(jié)進行了研究，以期為開發(fā)復(fù)合多糖產(chǎn)品提供技術(shù)條件。 關(guān)于植物、真菌多糖提取工藝，目前技術(shù)上還存在一些不足，如多糖提取周期長、多糖提取率低、多糖產(chǎn)品純度低、雜質(zhì)多等。這些問題不僅增加了多糖制品的成本，而且影響了產(chǎn)品質(zhì)量。對多糖提取工藝的關(guān)鍵技術(shù)環(huán)節(jié)進行深入研究是克服這些問題的唯一途徑。 本研究以藥用植物刺五加，真菌滑菇材料，用單因子篩選和正交實驗分析了多糖水提醇沉工藝中各因素的最佳條件。經(jīng)試驗確立的刺五加

3、多糖水提醇沉工藝參數(shù)如下：水提溫度為90℃，提取時間150 min，水料比18:1，提取次數(shù)2次；醇沉溫度為-20℃，時間36 h，乙醇與浸提液比例為4:1，pH值7?；蕉嗵撬峁に噮?shù)如下：提取溫度90～100℃，水料體積比為40:1，提取1.5 h，提取次數(shù)1次。 對多糖提取液去色素、去蛋白的研究結(jié)果如下：通過比較860021、DM2、330、D941、D202R．等樹脂，活性炭和H<,2>O<,2>對刺五加多糖提取液去色

4、素，去蛋白效果，確定了用D941樹脂動態(tài)吸附法不僅可去除刺五加多糖中的色素，而且對蛋白也有很好的去除作用。該方法對刺五加多糖提取液脫色率為84.39％，去蛋白率為85.00％，多糖保留率為83.38％。隨后采用此法對香菇多糖提取液進行應(yīng)用，結(jié)果顯示D941樹脂法在香菇多糖提取液中去色素、蛋白完全可行，可使其脫色率，去蛋白率，多糖保留率分別達(dá)到87.28％，92.34％和68.98％。此方法把多糖去色素和去蛋白合并為一步，縮短了多糖提取的

5、工藝流程，降低了成本，提高了效率。 刺五加多糖提取液經(jīng)D941樹脂法去色素、蛋白后，采用DEAE-Sepharose F．F陰離子交換層析柱，進一步純化。結(jié)果如下：過DEAE-Sepharose F．F柱后得到了兩個多糖組分As-1和As-2，對兩組分進行紫外可見光譜檢測，顯示As-2多糖組分在200 nm～400 nm區(qū)間處沒有明顯的特征吸收峰，表明刺As-2多糖組分已沒有蛋白質(zhì)、核酸和其它雜質(zhì)，但As-1在200nm～400

6、 nm區(qū)間處仍有特征吸收峰，對As-1組分用Sephadex-G200來進一步分離和驗證多糖的純度，結(jié)果顯示Sephadex-G200洗脫曲線顯示了一個對稱峰，表明洗脫出來的多糖組分已經(jīng)均一。此外，我們還對滑菇最適液態(tài)培養(yǎng)菌株進行了篩選，研究了不同碳源、氮源對滑菇菌絲體產(chǎn)量的影響，采用正交設(shè)計法進行滑菇液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)基配方篩優(yōu)化。結(jié)果顯示：所篩選的13個滑菇菌株中C3-3林盛最適合液態(tài)培養(yǎng)；液體發(fā)酵培養(yǎng)基的碳氮源優(yōu)化研究中，所采取的一系列