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1、血液中白細(xì)胞被血管內(nèi)皮細(xì)胞捕獲、沿著血管內(nèi)皮細(xì)胞滾動、穩(wěn)定粘附于血管內(nèi)皮細(xì)胞上、跨血管內(nèi)皮細(xì)胞遷移并最終到達(dá)炎癥部位是一個受嚴(yán)格調(diào)控的復(fù)雜多步驟的過程。L—選擇素組成性地表達(dá)在白細(xì)胞微絨毛頂端,是白細(xì)胞與血管內(nèi)皮細(xì)胞相互作用過程中最先行使功能的分子。除了作為粘附分子發(fā)揮作用,L—選擇素還作為信號分子在白細(xì)胞粘附過程中起始信號轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。L—選擇素與單克隆抗體的結(jié)合能夠引起肌動蛋白細(xì)胞骨架重排、細(xì)胞形態(tài)改變、氧呼吸爆發(fā)以及細(xì)胞內(nèi)TNF—α和
2、IL-8基因表達(dá)上調(diào)等一系列生理事件。但在白細(xì)胞起始粘附的過程中,L—選擇素引起肌動蛋白細(xì)胞骨架重排的機(jī)制還缺乏研究。 Lck激酶是非受體蛋白酪氨酸激酶Src家族的成員之一,特異性地在T淋巴細(xì)胞中表達(dá),并且在T淋巴細(xì)胞的活化及發(fā)育過程中發(fā)揮著重要作用。Lck激酶包含一個N端膜定位結(jié)構(gòu)域、一個獨(dú)有結(jié)構(gòu)域、一個SH3結(jié)構(gòu)域、一個SH2結(jié)構(gòu)域、一個酪氨酸激酶結(jié)構(gòu)域和一個C端負(fù)調(diào)控結(jié)構(gòu)域。在之前的研究中我們已經(jīng)證明,Lck是L—選擇素
3、交聯(lián)后最先活化的激酶。 Vavl分子是一種分子量為95 kDa的蛋白,表達(dá)在所有血源性細(xì)胞中并且通過磷酸化而轉(zhuǎn)變?yōu)榛罨问?。Vavl主要作為Rho家族GTP酶的鳥苷酸交換因子,因而可以參與多種和細(xì)胞骨架相關(guān)的信號通路。Vavl分子含有一個富含脯氨酸的序列和一個串聯(lián)的SH3,SH2和SH3結(jié)構(gòu)域,這也暗示著其可以在信號通路中充當(dāng)接頭蛋白。 本論文主要探討了在L—選擇素的交聯(lián)引發(fā)肌動蛋白細(xì)胞骨架重排的過程中,Lck激酶與V
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