尾懸吊模擬失重對大鼠卵巢功能及其組織中HIF-1α表達的影響.pdf

1、人類進入太空后,重力幾乎完全消失,處于重力變化、輻射、噪音、晝夜節(jié)律丟失等各種復(fù)雜因素共存的空間環(huán)境中。這種復(fù)雜的環(huán)境會對人體心血管、肌肉、骨骼及血液系統(tǒng)造成很大影響。失重對生殖系統(tǒng)尤其是卵巢影響的研究報道較少。隨著越來越多的女性航天員參與太空活動,研究失重對女性生殖系統(tǒng)的影響就顯得尤為重要。本實驗采用Morey-Holton尾懸吊模型來模擬失重環(huán)境,研究失重對雌性大鼠卵巢形態(tài)和功能以及卵巢組織中缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia-in

2、ducible factor-1 alpha,HIF-1α)表達的影響。經(jīng)醫(yī)院倫理委員會批準后進行動物實驗。主要研究內(nèi)容和結(jié)果包括以下三部分。
　　1.采用尾部懸吊模擬失重,將25只成年健康雌性Wistar大鼠分為懸吊0d(地面對照組)、10d、20d、30d組和懸吊30d后解除懸吊恢復(fù)重力10d組,觀察各實驗組大鼠體重及生殖器官重量變化情況;HE染色觀察卵巢卵泡變化情況;免疫組化方法觀察卵泡增殖、凋亡情況;放射性免疫法(RIA)

3、測定血清雌二醇、孕酮、FSH、LH含量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),懸吊組大鼠在懸吊5d后體重明顯低于地面對照組,之后體重緩慢升高,解除懸吊恢復(fù)重力后,體重又明顯下降;懸吊10d后,大鼠卵泡數(shù)量明顯下降(P<0.05),解除懸吊后恢復(fù)不明顯;懸吊組大鼠與地面對照組相比,卵巢顆粒細胞增殖明顯下降(P<0.05),解除懸吊后有所恢復(fù)(P<0.05);懸吊組顆粒細胞凋亡明顯增加(P<0.05),恢復(fù)重力組有所下降,下降幅度不明顯;RIA結(jié)果顯示懸吊組大鼠E2含

4、量明顯下降(P<0.05),LH、FSH含量升高(P<0.05)。
　　2.選取15只成年健康雌性Wistar大鼠,隨機分為地面對照組、懸吊30d組、懸吊30d后解除懸吊恢復(fù)重力10d組大鼠各5只,分別與健康成年Wistar雄性大鼠按1:1合籠,檢測大鼠生殖能力。結(jié)果發(fā)現(xiàn),與對照組相比,尾部懸吊30d大鼠產(chǎn)仔數(shù)明顯降低(P<0.05),恢復(fù)重力10d組大鼠產(chǎn)仔數(shù)有所增加(P<0.05)。各實驗組仔鼠出生體重?zé)o明顯差異。另外,懸吊3

5、0d組大鼠,有一只大鼠見拴后16d,體重停止增加且開始下降,最終未生育。
　　3.選取60只成年健康雌性Wistar大鼠,隨機分為尾懸吊6h、12h、24h、2d、3d、5d、7d、14d、21d組和0h組(地面對照組),采用免疫組織化學(xué)和RT-PCR技術(shù)檢測大鼠卵巢組織中HIF-1α的表達變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn),模擬失重6h、12h大鼠卵巢組織中HIF-1α蛋白和HIF-1αmRNA表達均明顯高于對照組(P<0.05)。
　　綜上

6、所述,本研究運用常規(guī)石蠟染色、免疫組化、RT-PCR和RIA檢測技術(shù),系統(tǒng)觀察和分析了模擬失重狀態(tài)下大鼠卵巢形態(tài)和功能以及HIF-1α表達的變化。結(jié)果顯示,模擬失重造成實驗大鼠體重減輕,卵泡發(fā)育受到抑制,性激素分泌功能紊亂,卵巢儲備功能和生育能力下降,這種影響通過重力的恢復(fù)而有一定程度的恢復(fù)。研究結(jié)果還提示,HIF-1α在模擬失重早期參與了大鼠卵巢的應(yīng)激反應(yīng),并可能介導(dǎo)下游靶基因產(chǎn)生一系列保護效應(yīng)。本研究提示,尾懸吊模擬失重對實驗大鼠卵