連續(xù)性血液透析濾過對多器官功能障礙犬器官功能和細胞因子的影響及作用機制研究.pdf

1、目的：復(fù)制符合多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrorne，MODS)發(fā)病因素，病理過程和臨床特征的標(biāo)準(zhǔn)化動物模型。 方法：15只雄性Beagle犬，體重14～16.3kg(由新疆醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心提供)。實驗前禁食24h，正常飲水。動物戊巴比妥鈉30mg/kg靜脈麻醉后，稱重，固定，消毒，行氣管插管術(shù)，管經(jīng)口插入深26cm，插管成功后接呼吸機輔助呼吸，模式為容量控制通氣(CM

2、V)，參數(shù)為潮氣量15ml/kg、呼吸頻率為20～25次/min、呼氣末正壓(PEEP)2～3cmH2O；行右股動脈穿刺術(shù)，置入5F動脈留置針，連接心功能監(jiān)護儀行血流動力學(xué)監(jiān)測；行左股靜脈穿刺術(shù)，置入7F導(dǎo)管用于持續(xù)靜點戊巴比妥鈉2～4mg/kg/h和留取血標(biāo)本；分別采用左頸內(nèi)靜脈和右股靜脈留置11F單針雙腔導(dǎo)管建立血管通路，應(yīng)用CVVHDF治療。所有導(dǎo)管直接插入，切口行外科縫合。間斷用肝素鈉鹽水沖導(dǎo)管預(yù)防凝血。留置導(dǎo)尿管，心電監(jiān)護，監(jiān)

3、測肛溫，必要時使用電熱毯保持體溫在38～39℃。 術(shù)后30分鐘，采用Wiggers法[1]造成失血性休克，維持平均動脈壓(MAP)6.0-7.3kPa(45-54mmHg)之間1小時。休克終點，經(jīng)頸靜脈快速回輸失血和兩倍失血量的林格氏液?；剌敭匨AP和心排指數(shù)(CI)均能恢復(fù)至傷前水平。復(fù)蘇12h后由靜脈持續(xù)12h滴入內(nèi)毒素(大腸桿菌OIllB4內(nèi)毒素，第二軍醫(yī)大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)部微生物學(xué)教研室提供)1.5mg/kg。觀察實驗動物犬的

4、癥狀、體征、生存率、臟器功能指標(biāo)，如丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、血尿素氮(BUN)和血肌酐(Cr)與組織病理變化。 結(jié)果：實驗前MAP分別是114.2±13.2mmHg。造成失血性休克后MAP降至54.8±6.1mmHg，復(fù)蘇后恢復(fù)至正常90％左右。輸入內(nèi)毒素后，MAP呈進行性下降，明顯低于實驗前(P<0.01)。休克期PaO2和PaCO2降低，與傷前差別顯著(P<0.05)； 輸入內(nèi)毒素后

5、，PaO2呈進行性降低，PaCO2呈明顯升高趨勢。在MODS病變發(fā)展過程中，實驗動物在二次打擊后癥狀、體征與功能指標(biāo)(ALT、AST、BUN及Cr)均發(fā)生明顯變化，肝、腎等臟器病理損傷明顯。結(jié)論：該模型的致傷因素、發(fā)病過程、臨床特征及診斷標(biāo)準(zhǔn)都與臨床典型的雙相遲發(fā)MODS相似，是目前比較理想的和適用于臨床防治研究的MODS動物模型。 目的：觀察連續(xù)性血液透析濾過(CWHDF)對多器官功能障礙綜合征(MODS)犬重要器官功能和組織

6、病理的影響，探討CVVHDF治療MODS的可能機制。 方法：15只Beagle犬采用失血性休克+復(fù)蘇灌注+內(nèi)毒素血癥復(fù)制MODS模型[2]，隨機分為CVVHDF組(n=8)和MODS組(n=7)，CVVHDF組在內(nèi)毒素注射完畢后給于CVVHDF治療12小時，MODS組不給CVVHDF治療。檢測各時間點動脈血氧分壓(PaO2)、動脈血二氧化碳分壓(PaCO2)、血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)、肌酐(C

7、r)、血尿素氮(BUN)及血漿內(nèi)毒素(LPS)的水平，同時觀察兩組動物肝、腎組織病理形態(tài)學(xué)改變。 結(jié)果：CVVHDF組治療過程中，MAP基本保持在正常水平，尤其在T5、T6及T7時間點顯著高于MODS組(P<0.01)；PaO2逐漸升高，與MODS組在T4、T5、T6及T7時間點相比相差顯著(P<0.05)；血清肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及血漿內(nèi)毒素(LPS)水平較MODS組降低(P<0.05)。傷后兩組動物肝、腎組織均可

8、見不同程度的充血、灶狀與大片狀壞死、出血及炎性細胞浸潤。CVVHDF組器官病變較MODS組明顯減輕。 結(jié)論：連續(xù)性血液透析濾過能明顯改善內(nèi)毒素誘導(dǎo)的低血壓，提高動脈血氧分壓，有效清除血漿內(nèi)毒素，改善腎功能，減輕肝、腎組織病理損害。 目的：觀察連續(xù)性血液透析濾過(CVVHDF)對多器官功能障礙綜合征(MODS)犬器官功能和細胞因子的影響，探討CVVHDF治療MODS的可能機制。 方法：15只Beagle犬采用失血

9、性休克+復(fù)蘇灌注+內(nèi)毒素血癥復(fù)制MODS模型，隨機分為CVVHDF組(n=8)和MODS組(n=7)，CVVHDF組在內(nèi)毒素注射完畢后給于CVVHDF治療12小時，MODS組不給CWHDF治療。免疫組織化學(xué)分析兩組肝、腎組織中IL-6、IL-10陽性蛋白表達。半定量逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)測定兩組肝、腎組織中IL-6、IL-10 mRNA水平。ELISA方法檢測血漿IL-6、IL-10濃度。 結(jié)果：CVVHDF治療開

10、始后血漿IL-6、IL-10明顯下降，在內(nèi)毒素注射完畢后3h(T4)、6h(T5)、9h(T6)及2h(T7)時間點顯著低于MODS組(P<0.01)。超濾液中能檢測出IL-6，IL-6篩選系數(shù)(SC)為0.27±0.13。超濾液中未能檢測出IL-10。免疫組織化學(xué)分析兩組肝、腎組織中IL-6、IL-10陽性蛋白表達，在MODS組IL-6陽性蛋白表達水平顯著增高，而在CVVHDF組IL-10陽性蛋白表達水平顯著增高。應(yīng)用半定量RT-PC

11、R方法測定肝腎組織IL-6、IL-10 mRNA表達水平，在MODS組IL-6 mRNA表達水平顯著高于正常水平和CWHDF組(P<0.01)，而在CVVHDF組IL-10mRNA表達水平顯著高于正常水平和MODS組(P<0.01)。 結(jié)論：CVVHDF能有效清除循環(huán)中細胞因子IL-6、IL-10，有助于重建機體免疫系統(tǒng)內(nèi)穩(wěn)狀態(tài)。超濾液中能檢測出IL-6，表明CWHDF治療通過對流機制可以有效清除血漿中的IL-6。超濾液中未能檢