HSF1在嚴重?zé)齻装Y反應(yīng)中調(diào)控HMGB1和IL-10表達分子機制的研究.pdf

1、熱休克因子1(heat shock factor1，HSF1)是最早被發(fā)現(xiàn)的熱休克轉(zhuǎn)錄因子。在各種應(yīng)激反應(yīng)，特別是熱休克反應(yīng)時調(diào)控HSPs(heat shockproteins，HSPs)的誘導(dǎo)表達中發(fā)揮重要作用。 目的：本研究以RAW264.7細胞系為研究對象，以燒傷血清刺激建立燒傷細胞模型，在體外研究HSF1與HMGB1(high mobility groupbox)和IL-10(Interleukin-10)啟動子區(qū)HSE

2、(heat shock element)相互作用產(chǎn)生的抗炎癥機制。 方法：Western blot法檢測燒傷血清刺激后的RAW264.7細胞與正常對照組中HSF1與NF-κB表達量，應(yīng)用凝膠阻滯(EMSA)法檢測HSF1與炎癥因子HMGB1和抗炎癥因子IL-10啟動子區(qū)相互作用，同時探索NF-κB是否參與上述HSF1-HSE的相互作用。 結(jié)果： (1)發(fā)現(xiàn)正常培養(yǎng)條件下的RAW264.7細胞幾乎不表達HSF1少量

3、表達NF-κB，而加入燒傷血清刺激后的細胞能夠明顯穩(wěn)定表達HSF1同時大量表達NF-kB； (2)結(jié)果顯示HSF1與HMGB1和IL-10的啟動子區(qū)HSE有相互作用； (3)凝膠超阻滯法檢測發(fā)現(xiàn)NF-κB并不參HSF1與HMGB1和IL-10啟動子區(qū)HSE的結(jié)合。 結(jié)論： (1)燒傷血清刺激細胞后可誘導(dǎo)細胞發(fā)生自身保護反應(yīng)，大量表達HSF1蛋白，通過一系列細胞信號通路抑制炎癥反應(yīng)的發(fā)生，也證明體外燒傷模型