丹參及其復(fù)方活血消腫本質(zhì)與其對(duì)大鼠肺損傷的防治作用.pdf

1、近年發(fā)現(xiàn)的AQPs改變了人們以往對(duì)水分子跨膜運(yùn)輸?shù)恼J(rèn)識(shí)。AQPs分布廣泛、功能強(qiáng)大，水分子跨越CM的快速輸運(yùn)是通過CM上的AQPs實(shí)現(xiàn)的。隨著對(duì)AQPs研究的深入，發(fā)現(xiàn)AQPs的表達(dá)失常與人體很多疾病的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸密切相關(guān)，如腫瘤，水腫性疾病，消化系統(tǒng)疾病，神經(jīng)系統(tǒng)疾病等。AQPs引起的水運(yùn)行失常性疾病屬于中醫(yī)“水腫”證范疇?！胺螢樗显础?，“通調(diào)水道，散布津液”。中醫(yī)有“血不利則為水”，可見血瘀與水有一定內(nèi)在聯(lián)系。結(jié)合現(xiàn)代醫(yī)學(xué)提

2、示痰飲與微血管病變、血漿粘稠度增加、血小板功能異常及凝血、抗凝血機(jī)制異常等因素有關(guān)。AQP1 是最早發(fā)現(xiàn)的AQPs成員。在肺組織中，AQP1有較強(qiáng)的表達(dá)，主要分布于MVEC膜及肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞頂膜。AQP1是肺血管滲透性的必要因素，可能參與肺的水液清除。在LPS所致ALI中，肺MVEC膜上AQP1表達(dá)數(shù)量明顯減少，當(dāng)PE于損傷24h后明顯開始減輕時(shí)，AQP1有所恢復(fù)，因此推測肺MVEC膜上表達(dá)的AQP1增加對(duì)肺間質(zhì)水腫液有吸收作用。

3、 中藥藥理顯示：活血中藥的藥理效應(yīng)可能與其對(duì)血液與組織間水的調(diào)節(jié)密切相關(guān)?；钛鏊幱懈纳芃C，促進(jìn)血液流動(dòng)，抑制血小板集聚，降低血液粘度等作用。一些具有活血利水功用的中藥和中藥復(fù)方可以調(diào)節(jié)AQP的表達(dá)。SM為常用的活血化瘀要藥，能改善血液流變性，降低血粘度，加速紅細(xì)胞電泳率，進(jìn)而改善MC。其制劑SMI可解除微血管痙攣，增加血流速度，改善和疏通MC。研究表明SM對(duì)機(jī)體局部水運(yùn)行有調(diào)節(jié)作用。但SM是否對(duì)MVEC膜上表達(dá)的AQP蛋白具有

4、調(diào)節(jié)效應(yīng)，目前無相關(guān)研究與文獻(xiàn)報(bào)道。 本研究通過制備ALI和DN大鼠模型，觀察活血化瘀藥SM及其復(fù)方（ZHA）分別對(duì)急性PE和CLI大鼠肺MVEC膜的AQP1 是否具有調(diào)節(jié)效應(yīng)。目的為發(fā)現(xiàn)中藥有效成分對(duì)AQP1起作用的關(guān)鍵物質(zhì)，從現(xiàn)代醫(yī)學(xué)分子水平解釋其“活血”效應(yīng)的主要靶蛋白，可為臨床評(píng)價(jià)“活血”效應(yīng)與機(jī)制提供藥理學(xué)依據(jù)。利用SM及其復(fù)方觀察其對(duì)AQP1的調(diào)節(jié)作用，為與AQPs相關(guān)的水運(yùn)行失常類疾病的預(yù)防和治療提供藥理學(xué)支持，將

5、有很大的臨床應(yīng)用前景。 實(shí)驗(yàn)一丹參對(duì)內(nèi)毒素所致大鼠急性肺損傷防治效應(yīng)與AQP1的調(diào)節(jié) 目的：探討SM對(duì)LPS致ALI大鼠肺AQP1的調(diào)節(jié)作用。 方法：SD大鼠48只，隨機(jī)分為正常組、預(yù)保護(hù)組、7d模型組、7d治療組、8h模型組、8h治療組，每組各8只。分別于8h和7d后電鏡及HE染色觀察各組大鼠肺組織病理改變；肺W/D觀察肺臟水通透性的變化；IH及肺組織勻漿后WB法檢測AQP1表達(dá)變化；測定血液PaO2、血液流變

6、學(xué)、ET-1濃度。 結(jié)果：與正常組相比，模型組動(dòng)物PaO2值明顯下降（P <0.05）；RR明顯升高（P<0.05）；干預(yù)、治療組與模型組相比PaO2明顯升高。與正常組相比，模型組血清（漿）中ET-1濃度顯著增高（P<0.05）；而干預(yù)、治療組大鼠與模型組相比，ET-1濃度顯著降低（P <0.05）。模型組均出現(xiàn)ARDS等肺損傷癥狀。7d治療組的PE病理改變與7d模型組比較明顯減輕（P <0.05），血流變明顯改善；AQP1蛋白

7、表達(dá)兩組均基本恢復(fù)正常水平，分別與正常組比較無明顯差異（P >0.05）。8h治療組和預(yù)保護(hù)組與8h模型組比較PE病理改變明顯減輕（P <0.05），血流變明顯改善；8h治療組和預(yù)保護(hù)組的AQP1表達(dá)水平與8h模型組相比明顯上調(diào)（P <0.05），其中SM預(yù)保護(hù)組AQP1表達(dá)上調(diào)明顯，有顯著差異（P <0.01）。與正常組相比，模型組大鼠W/D值顯著升高；而與模型組相比，經(jīng)SMI預(yù)處理和治療的大鼠W/D值顯著降低。 實(shí)驗(yàn)二丹參復(fù)

8、方煎劑（澤黃煎劑）對(duì)糖尿病腎損害大鼠肺組織AQP1的調(diào)節(jié)效應(yīng) 目的：觀測DN大鼠肺組織AQP1的表達(dá)及其活性的變化。 方法：SD大鼠40只，隨機(jī)分為正常組、DN組、丹參復(fù)方煎劑（ZHA）組、美吡達(dá)組，每組10只。STZ腹腔注射制作DN大鼠模型。4mon后檢測各組大鼠FBG、SCR、BUN值；觀察肺組織的病理改變；IH方法檢測各組大鼠肺組織AQP1的表達(dá)。 結(jié)果：DN大鼠均出現(xiàn)多飲、多食、多尿癥狀，消瘦，毛發(fā)粗糙堅(jiān)

9、硬，尾部發(fā)黑、有脫皮現(xiàn)象。丹參復(fù)方煎劑組和美吡達(dá)組動(dòng)物的一般情況較好，體重比較穩(wěn)定，“三多一少”癥狀較DN組動(dòng)物明顯減輕，皮毛較光澤。與正常組相比，DN組動(dòng)物FBG、Scr、Bun值明顯上升，RR明顯升高（P<0.05）；丹參復(fù)方煎劑組和美吡達(dá)組與DN組動(dòng)物相比FBG、Scr、Bun值明顯下降（P<0.05）。DN組大鼠肺泡間隔及毛細(xì)血管壁增厚；正常組與DN組相比，肺組織表達(dá)的AQP1明顯下降，丹參復(fù)方煎劑組較DN組和美吡達(dá)組表達(dá)升高（

10、P <0.05）。 結(jié)論： 1 LPS所致ALI以PE為主要表現(xiàn)。SM能上調(diào)肺組織AQP1的表達(dá)，改善ALI大鼠的血液流變性，減輕PE病理狀態(tài)。提示SM對(duì)肺組織AQP1的調(diào)節(jié)效應(yīng)是其“活血消腫”功效的本質(zhì)之一。 2 DN大鼠肺組織AQP1表達(dá)下降、MC障礙，多屬中醫(yī)“血瘀證”狀態(tài)。AQP1參與了DM肺組織微血管病變的發(fā)生與發(fā)展，丹參復(fù)方煎劑（ZHA）可調(diào)節(jié)AQP1表達(dá)水平，減輕DM的肺組織病變。提示SM及其復(fù)方“