涼血活血中藥防治放射性肺損傷的療效及作用機(jī)制研究.pdf

1、目的：模擬臨床放射治療過程，建立大鼠放射性肺損傷模型，通過研究大鼠肺臟組織學(xué)改變和細(xì)胞因子的動態(tài)變化，觀察放射性肺損傷的中醫(yī)證候特點，評價涼血活血中藥的治療作用，并探討其作用機(jī)制。 方法： 取160只Wistar雌性大鼠，隨機(jī)分為空白對照組、模型組、中藥治療組、單純中藥對照組(每組40只)。中藥湯劑由生地、丹皮、連翹、莪術(shù)、桃仁、川芎、地龍組成。按傳統(tǒng)煎藥法煎取藥液，以恒溫水浴鍋濃縮成含生藥1.5g/ml湯劑，于照射前1

2、周開始給中藥治療組及單純中藥對照組大鼠按18g/公斤體重灌胃給藥，每日1次；其余兩組給予等量生理鹽水灌胃。每日觀察大鼠進(jìn)食、活動、大小便、皮毛、眼鼻等基本情況，每周稱量體重調(diào)整給藥量。模型組及中藥治療組均給予每周2次，每次3Gy右肺照射，共10次，總劑量30Gy。分別于照射開始第3、5、8、12、26周時隨機(jī)選取每組大鼠各8只處死，剖胸觀察胸腔及雙肺大體標(biāo)本情況后，取受照射肺臟，測量肺系數(shù)，經(jīng)HE染色、苦味酸一天狼猩紅染色觀察肺臟病理改

3、變及微觀證候特點，結(jié)合病理學(xué)評分及圖像分析定量評價大鼠肺損傷程度及中藥療效；經(jīng)免疫組織化學(xué)染色，應(yīng)用Image pro plus5.0.2軟件測定TGF-β、TNF-α、IL-6、bFGF的表達(dá)，探討中藥作用機(jī)制。采用SPSS 11.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理。 結(jié)果： 1、模型組大鼠表現(xiàn)典型放射性肺炎及肺纖維化，經(jīng)測量肺系數(shù)、HE染色、膠原天狼猩紅染色觀察結(jié)合病理學(xué)評分及圖像分析評價大鼠肺臟組織學(xué)變化程度與空白對照組存在

4、明顯差異(P<0.01)。模型在活體表現(xiàn)及微觀病理角度反映出熱傷血絡(luò)與瘀血阻絡(luò)的中醫(yī)證候特點。 2、中藥治療組大鼠僅出現(xiàn)輕微的急性炎癥表現(xiàn)，大鼠發(fā)生肺纖維化程度較照射組明顯減輕：急性期放射性肺組織損傷評分明顯低于模型組(P<0.01)，纖維化期照射區(qū)域內(nèi)出現(xiàn)小點狀局灶性纖維化，其纖維化評分明顯低于模型組(P<0.01)，膠原天狼猩紅染色觀察膠原增生及膠原比例紊亂較模型組明顯降低(P<0.01)。熱傷血絡(luò)證及瘀血阻絡(luò)證較模型組明顯

5、減輕。 3、模型組大鼠TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF較對照組表達(dá)明顯增加(P<0.01)，中藥治療組在各觀察點各細(xì)胞因子均低于模型組(P<0.01)。空白對照組大鼠肺組織有TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF的弱表達(dá)， 結(jié)論： 1、小劑量多次照射法可以成功建立大鼠放射性肺損傷模型，病變典型，且動物無一因照射死亡，模型穩(wěn)定可靠，實驗可重復(fù)性好；便于觀察中醫(yī)證候特點，造模過程符合臨床放射治療實際，便

6、于動態(tài)觀察，更適合進(jìn)行早期干預(yù)研究，實用性強。 2、涼血活血中藥早期干預(yù)的大鼠，其早期炎癥表現(xiàn)和損傷程度明顯減輕，炎癥持續(xù)時間縮短，后期纖維化也明顯減輕。動物活體、肺臟標(biāo)本宏觀及組織微觀觀察，較模型組所出現(xiàn)的“熱傷肺絡(luò)證”和“瘀阻肺絡(luò)證”的表現(xiàn)均明顯減輕。 3、細(xì)胞因子TGF-β、TNF-α、IL-6和bFGF在放射性肺損傷形成及發(fā)展中，相互影響、相互作用，呈現(xiàn)規(guī)律性變化。涼血活血中藥可抑制細(xì)胞因子TGF-β、TNF-α