2023年全國(guó)碩士研究生考試考研英語(yǔ)一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁(yè)
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1、目的:通過(guò)體外不同條件培養(yǎng)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞,觀察血管生成素(angiopoietin,Ang)及其受體Tie2、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)表達(dá)變化規(guī)律,探討Ang/Tie2、VEGF對(duì)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響。
   方法:(1)體外培養(yǎng)小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞,采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Reverse Transcription Polymerase Chain

2、Reaction,RT-PCR)方法觀察正常糖對(duì)照組(D-glucose 5.6mmol/l,NG)、高滲對(duì)照組(Mannitol 25mmol/l+D-glucose 5.6mmol/l,DM)、高糖刺激組(D-glucose 30mmol/l,HG)不同時(shí)間點(diǎn)刺激小鼠腎小球內(nèi)皮細(xì)胞后,Ang1、Ang2、Tie2、VEGF mRNA表達(dá)的變化。(2)脂質(zhì)體分別轉(zhuǎn)染針對(duì)Ang2基因的 pcDNA3.1-Ang2質(zhì)粒和Ang2siRNA

3、,24h后RT-PCR法檢測(cè)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞Ang2mRNA表達(dá)變化情況。(3)四甲基偶氮唑藍(lán)比色法(MTT)法觀察高糖刺激和轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-Ang2質(zhì)粒24h后腎小球內(nèi)皮細(xì)胞的增殖情況。(4)Transwell小室法觀察高糖刺激腎小球內(nèi)皮細(xì)胞24h后細(xì)胞遷移率變化情況。
   結(jié)果:(1)高糖刺激組Ang1mRNA在12h表達(dá)明顯抑制,24h、72h、96h表達(dá)明顯上調(diào),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,0h、48h較正常對(duì)照組表達(dá)無(wú)明顯

4、變化。高糖刺激組Ang2mRNA僅在24h、72h、96h表達(dá)明顯上調(diào),而在0h、12h、48h與正常對(duì)照組比較表達(dá)無(wú)明顯變化。高糖刺激組Tie2mRNA在24h、72h、96h較正常對(duì)照組表達(dá)明顯升高,在0h、12h、48h與正常對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(2)高糖刺激組VEGFmRNA在24h、72h、96h較正常對(duì)照組表達(dá)明顯升高,在0h、12h、48h與正常組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。(3)轉(zhuǎn)染pcDNA3.1-Ang2質(zhì)粒和Ang2si

5、RNA 24h后,pcDNA3.1-Ang2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組較正常糖對(duì)照組Ang2mRNA明顯升高,Ang2siRNA轉(zhuǎn)染組較高糖刺激組Ang2mRNA明顯抑制,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(4)pcDNA3.1-Ang2質(zhì)粒轉(zhuǎn)染組細(xì)胞增殖較正常對(duì)照組明顯增快,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(5)高糖刺激組與正常糖對(duì)照組比較,高糖刺激組腎小球內(nèi)皮細(xì)胞遷移率明顯升高,與正常糖對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
   結(jié)論:(1)體外培養(yǎng)腎小球內(nèi)皮細(xì)胞可穩(wěn)定表達(dá)An

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