蘇丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ誘導(dǎo)小鼠淋巴瘤細(xì)胞突變機(jī)制的研究.pdf

1、蘇丹紅是一種人工合成的紅色染料，主要包括Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ四種類型，被廣泛用于溶劑、油、蠟、汽油的增色以及鞋、地板等增光方面，然而蘇丹紅也被非法添加入食品中以保持其色澤。研究表明，蘇丹紅對(duì)小鼠淋巴瘤細(xì)胞有顯著的細(xì)胞毒性和致突變作用，攝入含較高劑量蘇丹紅的食品就會(huì)增加致癌的危險(xiǎn)性。本研究中我們進(jìn)一步闡明蘇丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ的致突變分子機(jī)制，本試驗(yàn)采用“小鼠淋巴瘤細(xì)胞L5178Y/TK+/-致突變檢測(cè)方法”（L5178Y/TK+/- Mouse Ly

2、mphoma Mutation Assay，MLA）來獲得胸苷激酶基因（tk）突變克隆。為了檢測(cè)含功能性tk基因的11號(hào)染色體（11b）上DNA斷裂情況，我們挑取對(duì)照組和經(jīng)不同濃度蘇丹Ⅰ、Ⅲ和Ⅳ處理小鼠淋巴瘤L5178Y tk+/--3.7.2細(xì)胞得到的tk基因突變克隆，提取DNA，用基于PCR的雜合性缺失（Loss of heterozygosity，LOH）的分析方法考察11號(hào)染色體上分布的tk位點(diǎn)的雜合性缺失情況。最后通過Hoec

3、hst33342/PI雙熒光活染法檢測(cè)經(jīng)蘇丹Ⅲ和Ⅳ處理的細(xì)胞凋亡情況。從檢測(cè)結(jié)果來看150μg/mL蘇丹Ⅰ誘導(dǎo)的突變體中大克隆和小克隆發(fā)生LOH的比例分別為85％(17/20）、95％(19/20)，所有克隆發(fā)生LOH的比例為90％(36/40)；150μg/mL蘇丹Ⅲ誘導(dǎo)的突變體中大克隆和小克隆發(fā)生LOH的比例分別為85.2％（23/27）、100％(15/15)，所有克隆發(fā)生LOH的比例為90.5％(38/42)；500μg/mL蘇