P-糖蛋白在醋柳黃酮組分口服吸收中的作用與調(diào)控研究.pdf

1、中藥藥理活性成分的明確及其作用機制的研究，尤其是活性組分體內(nèi)過程的明確是中藥科學(xué)研究的關(guān)鍵問題，而中藥活性組分吸收機理的研究是中藥體內(nèi)過程研究的第一步，是中藥科學(xué)研究的瓶頸問題。揭示中藥活性組分的吸收機理，明確其吸收過程中轉(zhuǎn)運體的作用、作用機制與作用程度，以及中藥中多種活性組分在吸收過程中的相互作用，有利于建立中藥生物藥劑學(xué)基礎(chǔ)研究方法，揭示中藥作用特點及組方理論的科學(xué)內(nèi)涵。 本課題的目的為研究P-糖蛋白(P-glycoprot

2、ein，P-gp，MDR1)等外排型轉(zhuǎn)運體在中藥成分口服吸收過程中的作用，探索P-gp調(diào)控對其口服吸收的影響。研究工作選擇臨床長期應(yīng)用、對心血管疾病具有顯著預(yù)防與治療作用的中藥有效部位醋柳黃酮為模型藥物，重點選擇其中指標成分——異鼠李素等黃酮醇為研究對象，以基因工程細胞模型(MDR1轉(zhuǎn)染MDCKⅡ細胞)、Caco-2細胞模型、整體實驗動物模型三種吸收研究方法相結(jié)合，揭示“醋柳黃酮”組分的吸收機理及P-gp在其中的作用、P-gp調(diào)控對其吸

3、收的影響、P-gp介導(dǎo)醋柳黃酮中各組分與異鼠李素在透膜過程中的相互作用。三種不同層次的研究方法得到的結(jié)果具有良好的相關(guān)性，醋柳黃酮中三種主要組分大鼠灌胃后藥時曲線下面積、峰濃度大小均為山奈酚>槲皮素>異鼠李素；異鼠李素、槲皮素與山奈酚的Caco-2細胞模型A側(cè)(apical，項側(cè))到B側(cè)(basolateral，基底側(cè))表觀滲透系數(shù)分別為2.28±0.11、4.97±0.25、8.74±0.27(×10<'-6>，cm.s<'-1>)，

4、B側(cè)到A側(cè)表觀滲透系數(shù)分別為3.09±0.08、6.69±0.79、9.30±0.87(×10<'-6>，cm.s<'-1>)，比值分別為0.74、0.74與0.94，異鼠李素、槲皮素與山奈酚均存在腸道外排現(xiàn)象。在整體動物研究與Caco-2細胞轉(zhuǎn)運研究的基礎(chǔ)上，采用MDR1-MDCK Ⅱ細胞模型進一步研究了異鼠李素與P-gp的相互作用，異鼠李素MDR1-MDCK Ⅱ細胞模型A側(cè)到B側(cè)表觀滲透系數(shù)為1.22±0.11(×10<'-6>，c

5、m.s<'-1>)，B側(cè)到A側(cè)的表觀滲透系數(shù)為4.96±0.03(×10<'-6>，cm.s<'-1>)，其比值為0.24，試驗結(jié)果與前期試驗結(jié)果具有良好的相關(guān)性，進一步確證了異鼠李素是P-gp的底物，由P-gp等外排型轉(zhuǎn)運體介導(dǎo)的腸道外排與膽汁排泄導(dǎo)致醋柳黃酮中各組分藥時曲線的多峰現(xiàn)象。合用維拉帕米(P-gp抑制劑)與地高辛(P-gp底物)可增加異鼠李素的腸道吸收，增加異鼠李素的口服生物利用度；利福平等膽鹽排泄抑制劑可抑制異鼠李素的膽

6、汁排泄而增加其生物利用度。醋柳黃酮中其它組分與異鼠李素體內(nèi)過程均存在不同程度的相互作用，合用后各自腸道吸收均不同程度地增加，P-gp功能的抑制是其體內(nèi)藥動學(xué)相互作用的機制之一，其它某些外排型轉(zhuǎn)運體，如多藥耐藥性相關(guān)蛋白2與乳腺癌耐藥相關(guān)蛋白1也可能是介導(dǎo)此相互作用發(fā)生的機制之一。因此，醋柳黃酮有效部位給藥較其中組分單獨給藥更具有生物藥劑學(xué)的優(yōu)勢，其中各組分可相互增加口服生物利用度。 在分子水平、細胞水平和整體動物水平研究中藥組分