復(fù)發(fā)性流產(chǎn)婦女ACA陽性血清對(duì)BeWo細(xì)胞發(fā)育能力影響及阿司匹林的調(diào)節(jié).pdf

1、目的：目前，國內(nèi)把連續(xù)2次或2次以上發(fā)生在妊娠20周之前的妊娠產(chǎn)物或胎兒丟失(體重≤500g)稱為復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)(RSA)，文獻(xiàn)報(bào)道其發(fā)生率可高達(dá)5％。復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的病因復(fù)雜，因此其診斷和處理亦存在爭議。目前認(rèn)為導(dǎo)致復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的因素包括遺傳、解剖、胎盤異常、內(nèi)分泌、感染、吸煙、嗜酒、環(huán)境、精神因素、某些凝血和免疫調(diào)節(jié)蛋白缺乏等。檢出以上任何一種異常一般都可以找到對(duì)癥治療的方法，獲取不同程度的治療效果。但仍有約一半的復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患

2、者找不到明確的病因。生殖免疫研究顯示，自身免疫因素是造成復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的原因，某些難以解釋的復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)與自身抗體相關(guān)。自身免疫是母體對(duì)妊娠產(chǎn)物的反應(yīng)。與復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)相關(guān)的自身抗體有抗磷脂抗體(APA)、抗核抗體(ANA)、抗甲狀腺抗體(ATA)等，其中最常見的是抗心磷脂抗體(ACA)和狼瘡抗凝物(LC)。既往認(rèn)為自身抗體造成流產(chǎn)的病理機(jī)制是血管栓塞，因此阿司匹林以其抗凝作用而用于自身抗體陽性的復(fù)發(fā)性流產(chǎn)患者的治療。DiSomone

3、曾指出除了血栓形成之外，自身抗體對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的直接損害也可能是造成流產(chǎn)的原因。關(guān)于這方面的研究并不多。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞凋亡等細(xì)胞發(fā)育相關(guān)指標(biāo)的檢測，評(píng)價(jià)抗心磷脂抗體陽性復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)患者血清對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育的影響及阿司匹林對(duì)此的作用。 研究方法: 1．研究對(duì)象選取RSA患者8名為研究組，同期既往無不良孕產(chǎn)史，有一胎以上的正常足月分娩史的非孕期健康育齡婦女8名為對(duì)照組。 2．試驗(yàn)方法 2.1標(biāo)本采集無菌條件

4、下獲取研究組和對(duì)照組靜脈血清，-20℃凍存。 2.2 BeWo細(xì)胞培養(yǎng)所有實(shí)驗(yàn)中，BeWo細(xì)胞均分為4組培養(yǎng)，即在不含胎牛血清的ham F-12培養(yǎng)基中分別加入對(duì)照組血清、對(duì)照組血清加阿司匹林、研究組血清和研究組血清加阿司匹林。其中血清終濃度為10％，阿司匹林終濃度為25ug/ml。 2.3 滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育相關(guān)指標(biāo)的評(píng)價(jià)四甲基偶氮唑鹽比色法MTT檢測細(xì)胞成活力：酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)測定加入forskolin后培養(yǎng)上

5、清中β-HCG濃度；流式細(xì)胞術(shù)檢測BeWo細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白M30的表達(dá)。結(jié)果對(duì)照組490nm平均OD值為0.2414±0.0320，β-HCG平均濃度為22.9900±2.2568mIU/ml，M30平均表達(dá)為0.7900±0.1786％：研究組較對(duì)照組490nmOD值和β-HCG濃度明顯減少，M30平均表達(dá)明顯增多，其平均值分別為0.2061±0.0191，19.4488±1.8132mIU/ml和4.7868±0.5170％。對(duì)照組

6、加入阿司匹林后，490nm平均OD值為0.2411±0.0327，β-HCG平均濃度為23.2288±2.0581mIU/ml，M30平均表達(dá)為0.6325±0.1701％，與加入前相比差異不大。研究組加入阿司匹林后490nmOD值和β-HCG濃度明顯增多，M30平均表達(dá)明顯減少，平均值分別為0.2369±0.0311，21.5675±1.3338mIU/ml，2.7037±0.8920％。 結(jié)論：除了致栓塞作用外，抗心磷脂抗體

7、對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞的發(fā)育能力有直接的影響。它可使滋養(yǎng)細(xì)胞成活力減低，凋亡增多，滋養(yǎng)細(xì)胞分化、融合能力減低，β-HCG分泌減少。阿司匹林在一定程度上能夠逆轉(zhuǎn)這一不良影響，提示阿司匹林治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的機(jī)制除抗凝之外還可能有對(duì)滋養(yǎng)細(xì)胞發(fā)育能力的直接調(diào)節(jié)。 本試驗(yàn)研究結(jié)果為阿司匹林治療復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)提供了進(jìn)一步的理論依據(jù)，同時(shí)提示了阿司匹林可能用于胎盤功能不良的研究。在自身免疫型復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)的治療中，調(diào)節(jié)細(xì)胞功能的藥物也可能會(huì)起到一定作用